ELISA手工洗板五步法 甩尽孔内液体 将酶标板垂直倒扣,快速甩出孔内残留液体,避免手腕左右摇晃导致孔间交叉污染。 拍干残留液 使用洁净的厚吸水纸(非卫生纸)拍干孔内液体,拍板时需更换吸水纸位置,避免碎屑残留。 加注洗涤液 每孔加入350μL洗涤液(现配现用,含0.05%-0.2%吐温20的PBS缓冲液),注满孔口但避免溢出。 浸泡与甩干 静置浸泡1-2分钟(间歇摇动),随后甩尽液体并再次拍干,重复此步骤3-5次。 拍干后需快速加入后续试剂,避免酶标板干燥导致蛋白失活(尤其高温环境下)。 关键注意事项 洗涤液配置:20倍稀释浓缩液,使用无污染蒸馏水,结晶需溶解。 拍板技巧:力度适中,避免拍断板条或拍不干净。 避免污染:高浓度孔液体可能污染相邻孔,前两遍洗涤需格外谨慎。