Elisa：加显A显B回放

以下是关于ELISA试剂盒中显色液A和B液的详细说明：

一、主要成分与作用

显色液A（*溶液）‌

主要成分为H₂O₂，作为受氢体参与HRP（辣根过氧化物酶）催化反应，生成活性氧中间体‌。

显色液B（TMB溶液）‌

主要成分为四甲基联苯胺（TMB），作为供氢体（DH₂），与HRP催化产生的活性氧反应生成蓝色阳离子自由基，终止后变为黄色‌。

二、反应机制

HRP催化反应‌：

HRP + H₂O₂ → HRP-活性氧复合物

HRP-活性氧复合物 + TMB → 蓝色产物 + HRP

终止液（如硫酸）加入后，蓝色产物转化为黄色‌。

三、操作注意事项

添加顺序‌

需先加A液（H₂O₂）后加B液（TMB），以确保HRP充分催化H₂O₂生成活性氧，再与TMB反应‌。

稳定性‌

TMB显色液需现配现用（2小时内），避免氧化失效‌。

操作时需戴手套，避免皮肤接触（TMB为潜在致癌物）‌。

四、其他底物对比

酶类型显色液A显色液B产物颜色

HRPH₂O₂TMB/OPD蓝→黄

AP缓冲液PNP（对硝基苯磷酸酯）黄（405nm）

GOD葡萄糖对硝基蓝四氮唑蓝沉淀‌

五、常见问题

显色异常‌：若终止液含还原剂，可能导致蓝色产物褪色‌。

替代方案‌：OPD可作为TMB的替代显色剂，但毒性更高‌。

注：以上资料仅供参考，不作为实际数据，如需其他请咨询技术老师或品牌供应商。

天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。