TA Cloning™ 试剂盒双启动子（含 pCR™II 载体）提供了一种快速的一步法克隆策略，可将 Taq 扩增 PCR 产物直接插入质粒载体中。pCR™II 载体的 T7 和 Sp6 启动子可在体外转录插入片段，产生正义链或反义链产物。TA Cloning 试剂盒双启动子使用 pCR™II 克隆载体和 ExpressLink™ T4 DNA 连接酶，在十五分钟的室温连接步骤中生成连接产物。反应通常产生 >80% 包含插入片段的重组体。

TA Cloning™ 试剂盒双启动子的特点：
•快速且方便 — 15分钟、室温连接
• 高效 — 蓝/白斑筛选和 >80% 含正确插入片段的克隆体
• 灵活 — 可选择或氨苄抗性，实现灵活的抗生素选择
• 轻松 — 无需对 PCR 产物进行任何酶修饰
• 流程简化 — 不需要使用包含限制性位点的 PCR 引物

pCR™II 载体提供：
• 3'-T 突出端，用于直接连接 Taq 扩增 PCR 产物
• T7 和 Sp6 启动子，用于体外 RNA 转录和测序
• 两侧具有 EcoR I 位点的通用性多位点接头，可方便地切除插入片段
• M13 正向和反向引物位点，用于测序

TA Cloning™ 的工作原理
Taq 聚合酶具有非模板依赖性活性，可在 PCR 产物的 3' 末端引入单脱氧腺苷 (A)。该试剂盒中提供的线性化载体具有单个 3' 脱氧胸苷 (T) 残基。这使得 PCR 插入片段高效地与载体连接。

试剂盒配置
TA Cloning™ 试剂盒提供多种配置：含 One Shot™ INVF' 化学感受态大肠杆菌（K2050-01 和 K2050-40）、含 One Shot™ 0F' 化学感受态大肠杆菌（K2060-01 和 K2060-40）以及不含感受态细胞（K2750-20 和 K2750-40），分 20 和 40 次反应试剂盒规格。