尚恩-PK-15（猪肾细胞）-武汉尚恩生物技术有限公司手机版

详细介绍

一、细胞基本属性
细胞名称	猪肾细胞
细胞别称	PK-15; PK(15); PK(15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15
细胞货号	SNL-131
细胞种属	猪
生长情况	贴壁
培养条件	H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境	air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期	2-3天
培养基体积	T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法	1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未脱落时加2-3ml培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项	不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	92%FBS+8%DMSO(新手)或92%培养基+8%DMSO(高手*);
冻存规格	200-300万/ml，1ml每管
冻存方法	1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

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