2020年2月20日，欧盟发布Eudralex volume 4 Annex 1《无菌药品生产》第二次征询意见，为更好地了解法规动向，我们及时对文件进行解读。今天分享给大家的是文件中第9条关于“环境监测”部分中的粒子监测，后面我们还会继续解读浮游菌监测部分

附录摘要

无菌产品的生产涉及多种产品类型（活性成分、无菌辅料、内包材和成品制剂）、包装大小（单剂量到多剂量）、工艺（从高度自动化系统到手动工艺）和技术（例如生物技术，经典的小分子制造和封闭系统）。

着重强调的几个关键点：

1、QRM—QualityRisk Management，质量风险管理

QRM 是制造所有无菌产品时应使用的一般指南，以确保在产品中防止微生物、微粒和热原污染。QRM适用于本文件的全部内容，不会在特定段落中提及。

2、CCS---Contamination Control Strategy，污染控制策略

定义所有关键控制点，并评估所有控制措施（设计、程序、技术和组织）的有效性以及用于管理与污染相关风险监测措施。CCS应积极更新，并推动制造和控制方法的持续改进。

3、PQS---PharmaceuticalQuality System，药品质量体系

制造商的产品质量控制体系应包括并解决无菌产品制造的具体要求，并确保所有活动得到有效控制，从而使无菌产品中的微生物、微粒和热原污染降*低。

粒子和非活性粒子的监测

以下我们节选了第9条目中的重要内容并做了一些解读：

活性粒子和非活性粒子过程和环境的监控

环境和工艺监测构成整个CCS（污染控制策略）的一部分，用于监测旨在将微生物和微粒污染风险降低的控制措施。

解读：这里强调不能单独看监测点位的粒子是否超标来确定无菌保证，应当将粒子和浮游菌以及在APS过程中监测的数据放在一起综合来看他的无菌指标

环境监测主要监测以下元素：

i.环境监测非活性粒子

ii.环境和人员监测活性粒子

iii.APS无菌工艺模拟（仅无菌生产的产品）。

环境监测总体要求

9.4、应进行风险评估，以建立全面的环境监测计划，即取样地点、监测频率、使用的监测方法和培养条件（如时间、温度、需氧和/或厌氧条件）。这些风险评估应基于以下方面的详细知识：过程输入和产品、设施、设备、特定过程、所涉及的操作、历史监测数据、确认期间获得的监测数据以及与环境隔离的典型微生物菌群的知识。还应考虑其他信息，如流形可视化研究。应定期审查这些风险评估，以确认工厂环境监测计划的有效性。监测程序应在趋势分析和工厂CCS的总体背景下考虑。

解读：这里强调了风险评估和趋势分析的内容，这方面的内容在后面的9.10条目里详细提及。

9.8、应为活性和非活性颗粒监测的结果设置适当的警戒线和行动线。

警戒线和行动线的设置应根据洁净室定级结果或历史趋势数据来确定，并应定期审查。

9.9、应设置*（仅限非活性颗粒）B、C和D级的警戒线，以便检测和处理不利趋势

（例如，表明清洁度下降的许多事件或个别事件）。

解读：此条的要求很明显地说明粒子监测软件必须具备的功能是：

能够分别对不同级别的监测点位分别设置行动线和警戒线；而且在软件的趋势图上能够清晰看到该点位的级别（ABCD）和行动线、警戒线的设定值。

怎么去设置警戒线和行动线？

第一次设置需要根据洁净室定级的结果来设置，后续的设置需要和历史警戒线、行动线报警的次数分析来设置。

这样就需要软件具有“质量趋势回顾”功能。

9.10、监测程序应定义趋势分析的方法。趋势分析包括但不限于：

i.越来越多超过行动线和警戒线的违规事件报警

ii.连续超过警戒线报警

iii.有规律地发生孤立的超过警戒线事件，比如在预防性中经常发生的同样的事件

iv.微生物区系类型和数量的变化以及特定生物的优势。应特别注意不良生物或难以控制的生物，如孢子形成微生物。

解读：

1、以上趋势分析对软件的功能要求非常高：软件必须根据不同级别定义行动线和警戒线的能力；

2、软件具备对“连续超过警戒线”的分析判别能力；

3、所谓连续超过警戒线：以0.5μm为例；假定设置100个粒子/min为警戒线；200个粒子/min为行动线；

如果第一分钟，出现大于100而小于200的粒子计数器；

第二分钟，又出现大于100而小于200的粒子计数器；

第三分钟，再次出现大于100而小于200的粒子计数器；

作为异常事件，此时需要调查！

动态环境下的C级和D级的监测应根据定级数据和历史数据进行确定，以便进行有效的趋势分析。警戒线和行动线的要求将取决于所进行行动的性质。行动线可能比表6和表7中列出的要更加严格。

解读：此条的要求很明显地说明C级和D级可能也需要监测，但监测的频率和要求要降低很多。并且监测的数据也需要做趋势分析。警戒线要求不高，但行动线要求建议比表6高。

解决方案：可以使用便携式仪器做临时监测使用，以降低系统总成本。

注2：对于大于5μm粒子的监测，由于监测设备的限制，选择29（*）的限值。企业应根据历史数据设置警戒线，如果频繁持续计数低于行动线也有可能指示系统污染，（编者加：比如连续3分钟测量值大于警戒线小于行动线）此时应进行调查。对于*区域和B级区域，监测≥5μm粒子的重要性在于根据药企在CCS中定义的趋势是否为负面来决定。

解读：

1、警戒线需要根据历史数据来设置，因此监测软件有“质量趋势回顾”功能对用户而言非常有意义。

2、粒子计数连续低于行动线大于警戒线，需要进行调查；因此软件还需要具有连续多次超过警戒线的判别功能。对软件的要求比较高！

9.17 应连续监测*区域（对于颗粒物≥0.5和≥5μm），并采用适当的采样流速（至少28升（1ft3）每分钟），以便对所有干预、瞬间的异常事件和任何系统恶化的及时判断。解读：同时监测28.3L/min粒子数量的变化；同时监测连续几分钟的粒子变化。来实现判断。

系统应连续将每个测量值与表6中立方米的限值关联起来，关联的频率应确保能够及时识别和响应任何潜在的偏差。如果超过警戒线，应触发警报。程序应规定应对报警采取的措施，包括考虑额外的微生物监测。

解读：

前面已经说了根据28.3L/min的结果来及时判断；此时又要求和表6的数据关联？表6的数据是1m³的结果？如何将28.3L/min测量的数据和表6中的1m³限值关联？

这意味着监测系统的软件必须同时显示28.3/min的实时测量结果，而且还必须显示1m³实时累加的结果。

9.22由于电子噪声、杂散光、巧合等原因，偶尔出现的大颗粒物计数异常（尤其是≥5μm）可能被视为错误计数。然而，如果是连续或周期性的低水平计数异常表明可能有污染事件发生，应进行调查。此类事件可能表明室内空气供应过滤系统的早期故障、填充设备故障，或者也可能是机器设置和日常操作过程中的不良操作的诊断。

9.23 应根据“初始洁净室定级数据”、“常规监测数据”和“定期回顾数据”，在每个制造区域设置不同的监测条件，如监测频率、取样量或监测时间、警戒线和行动线以及纠正措施（包括调查）。

解读：

1、对于5µm粒子再次提到连续或周期性的低水平计数，也可能是污染，需要调查。监测软件有“连续多次超过警戒线”的判别功能对用户而言非常有意义。

2、软件需要具备“质量趋势回顾”的能力！