口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体阻断ELISA检测试剂盒（酶联免疫法）

使用说明书

产品名称

通用名：口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体阻断ELISA检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus Asia Ⅰ（ELISA）

货号：E310305

包装规格 96T×1/盒(注：酶标板不可拆)、96T×2/盒（注：酶标板一块可拆、一块不可拆）

预期用途

用于检测牛、羊、猪血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，可用于口蹄疫亚洲Ⅰ型疫苗免疫效果评价。

原    理

    系由预包被口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体的酶标板、抗体工作液、抗原液酶标记物及其他配套试剂组成，应用阻断酶联免疫法（ELISA）原理检测牛、羊、猪血清样本中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。实验时将稀释的样本与抗原液同时加入酶标板中孵育，样本中的抗体与酶标板上的抗体竞争抗原，阻断抗原与板的结合；经洗涤后，再加抗体工作液孵育；经洗涤后加入酶标记物孵育；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体。

试剂盒组成

储存及有效期 于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

适用仪器 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。

样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，*需置-20℃保存。

2.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

3.用已稀释的洗涤液将待检血清按64倍稀释（如5μl血清加入315μl洗涤液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。

参考值 实验正常的情况下，阴性对照A值≥1.0，阳性对照A值≤50%×阴性对照A值。

检验结果的解释

1.PI（阻断率）=（1-样本A值/阴性对照孔平均A值）×*，PI≥50%为阳性；PI＜50%为阴性。

2.本实验检测结果为阳性时表明待检样本中含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，且效价高于1:128，达到保护水平。

3.本实验检测结果为阴性时表明待检样本中不含有口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，或效价低于1:128，未达到充足保护水平。

4.如需了解样本抗体的zui终效价，可将样本进行梯度稀释，使PI≥50%的zui高稀释比例即为该样本抗体的zui终效价。

试验方法的局限性

    仅作为定性牛、羊、猪血清中口蹄疫亚洲Ⅰ型抗体，根据PI值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。