Thermo Scientific™ NAb™ 蛋白 L 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。固定化蛋白树脂的每个预装微量离心柱可从 25-500µL 血清或其他样品中快速纯化 100-1000µg 的 IgG。实际纯化的 IgG 数量取决于样品类型和所使用的特定离心柱。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 10 份抗体样品的收集管、缓冲液和简化方案。
Pierce 蛋白 L 琼脂糖包含已共价固定至高质量的 6% 交联的微珠化琼脂糖 (CL-6B) 的重组蛋白 L。该特殊种类的树脂可提供通用的色谱特点组合,用于获得高得率的目标免疫球蛋白和对目标免疫球蛋白进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于多种亲和纯化系统。
Pierce 蛋白 L 琼脂糖的特点:
•蛋白 L – 固定化蛋白 L 适用于选择性纯化具有 κ 轻链的人和小鼠抗体
• 琼脂糖树脂 – 支持物为 6% 交联的微珠化琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法的树脂
• 惰性且稳定 – 的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 L,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 标准容量 – Pierce 蛋白 L 琼脂糖包含正常上样量的固定化蛋白 L,提供5至10 mg 人 IgG/mL 树脂的结合容量
应用:
• 纯化与蛋白 A 或蛋白 G 琼脂糖结合能力较差的单克隆和多克隆抗体
• 从添加牛血清的培养物上清液中纯化单克隆抗体
• 蛋白 L 免疫沉淀和免疫共沉淀试验
• 纯化 ScFv 和含 κ 轻链的 Fab 片段
蛋白 L 是一种源自大消化链球菌这种细菌的免疫球蛋白结合蛋白 (36kDa),但现可通过重组法在大肠杆菌中生产。与主要通过免疫球蛋白 Fc 区(例如:重链)结合的蛋白 A 和蛋白 G 不同,蛋白 L 通过与轻链反应来结合免疫球蛋白。由于结合反应无需依靠重链的任何部分参与,因此与蛋白 A 和 G 相比,蛋白 L 能够结合更广泛的免疫球蛋白类型。蛋白 L 可与免疫球蛋白的所有代表类型相结合,包括 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD。单链可变片段 (ScFv) 和 Fab 片段也可与蛋白 L 结合。
虽然蛋白 L 能够广泛结合多种 Ig 类型,但它并不是通用的免疫球蛋白结合蛋白。蛋白 L 仅能与含有 κ 轻链(即 VL 结构域的 κ 链)的免疫球蛋白结合。人和小鼠的免疫球蛋白以 κ 轻链为主。其他免疫球蛋白则以 λ 轻链为主。此外,蛋白 L 仅能有效结合某些亚型的 κ 轻链。例如,它能够结合人类的 VkI、VkIII 和 VkIV 亚型,但无法与 VkII 亚型结合。小鼠免疫球蛋白的结合局限于具有 VkI 轻链的蛋白。
鉴于这些特定的有效结合要求,固定化蛋白 L 的主要应用是从腹水或培养物上清液中纯化已知具有 κ 轻链的单克隆抗体。蛋白 L 对于纯化培养物上清液中含有 VLk 的单克隆抗体非常有效,因为它不会结合存在于培养基血清补充液中的牛免疫球蛋白。此外,蛋白 L 不会干扰抗体的抗原结合位点,使其可用于免疫沉淀试验,即使使用 IgM 也是如此。
Pierce 蛋白 L 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学方法制备而成,与传统配体固定方法相比具有多种优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合容量树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 L。
Pierce 蛋白 L 琼脂糖是一种多功能亲和树脂,用于纯化包含特定 κ 轻链的哺乳动物 IgG 同种型。蛋白 L 特别适用于分离小鼠 IgG VkI 以及人 IgG VkI、VkIII 和 VkIV 的单克隆抗体。
交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:
•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
• 平均粒径:45 至 165 微米
• 排阻极限:10,000至4,000,000 道尔顿
•体积流速:约1 mL/分钟(对于1 cm 直径柱)
•线性速度:30 cm/h
• 压力:低于 25psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)
更多产品数据
• 使用抗体结合蛋白进行抗体纯化
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.