Thermo Scientific 蛋白 A Plus 琼脂糖 NAb 离心柱便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个柱包含 5 mL 固定化蛋白树脂,可从 2-10 mL 血清或其他样品中快速纯化 5-65 mg IgG。纯化的 IgG 实际量取决于样品类型和使用的特定离心柱。
Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖是一种适合抗体纯化的通用、高性能亲和树脂。它包含纯化天然蛋白 A,共价固定于高密度、高质量的交联 6% 微珠状琼脂糖中 (CL-6B)。在现有的许多各种形式固定化蛋白 A 亲和树脂中,本产品可提供通用的色谱特点组合,用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于多种亲和纯化系统。
Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖的特点:
•天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 适用于从人、兔、猪、犬或猫血清中进行多克隆 IgG 纯化
• 琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法较常用的树脂
• 惰性且稳定 – 的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 A,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 高容量 – Pierce 蛋白 A 琼脂糖的这一 “Plus” 类型包含密集上样量的固定化蛋白 A,提供大于 34 mg 人 IgG/mL 树脂(约 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 树脂)的结合容量
蛋白 A 是由多种菌株生成的一种细胞壁组分。蛋白为46.7kDa 的单链多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四个高亲和力 (Ka= 10^8/mol) 结合位点,能够与选定哺乳动物物种的 IgG 类抗体 Fc 区相互作用。IgG 结合功能在 pH 值 8.2 时,但在中性和生理缓冲液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效结合。
蛋白 A 是一种源自细菌的蛋白,对抗体(尤其是 IgG 类抗体)的 Fc 部分具有高亲和力和特异性。与其替代品(蛋白G)相比,蛋白A对兔、猪、狗和猫的 IgG亚类结合力。蛋白A对人IgG也具有较高的结合力,但对IgG3的结合力很弱。蛋白 A 与小鼠 IgG1 的结合作用较弱,因此不推荐用于大多数包含该抗体同种型的应用。
Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合容量树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留固定化蛋白 A 的结合功能。
交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:
•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
• 平均粒径:45 至 165 微米
• 排阻极限:10,000至4,000,000 道尔顿
•体积流速:约1 mL/分钟(对于1 cm 直径柱)
•线性速度:30 cm/h
• 压力:低于 25psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)
更多产品数据
• 使用抗体结合蛋白进行抗体纯化
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Pierce™ 蛋白 A Plus 琼脂糖
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.