检测方法简介

1)温度探头比对及探头布置

①探头校正

试验开始前将测试用湿热探头放到校验炉内进行温度校准，低温探头设置为低点、高点、测量点。

试验结束后，将所有的湿热探头进行“低点”和“高点”温度复核，确认试验后温度仪表的误差不大于0.5℃。

②探头布置

将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

2）空载热分布试验

①布点

将经过校验的温度探头编号（一般为16根探头），通过设备的验证接口放入灭菌室内。

加热介质进口处于设备自身温度探头处必须各放一根探头。

将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头其余温度探头均匀地放在腔内各处。各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

②程序运行

按预定的灭菌程序如 ℃× min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。

③结果评价

“冷点”确定

试验中，标准探头得的温度Z低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。予以特别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。

温度均匀度

每次灭菌程序运行过程中，灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。

3)满载热穿透试验

①探头校正：同上。

②物品装载

一般选择Z大装载。如果可能，应选择包装Z大装载方式在内的灭菌实践中使用各种装载方式反复进行，每种装载方式至少应进行3次重复性试验，以确保试验的准确性。

③探头布置

将经过校验的16个温度探头编号，通过设备的验证接口放入灭菌室内。

加热介质进口处与设备自身温度探头处必须各方一根探头。

将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。

④程序运行

按预定的灭菌程序如 ℃× min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。

结果评价

“冷点”确定

试验中，标准探头得的温度Z低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。空载热分布试验和装载热分布试验测得的“冷点”位置可能不同，分别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。

温度均匀度

灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。

4)生物指示剂试验

①灭菌物品的装载方式

一般为Z大负载，但是如果在实际生产中也采用在Z小负载的情况下灭菌的工艺过程，则应包括Z小负载。

②标准探头和生物指示剂的布置

选用16支湿热探头，编好号，插在待灭菌的产品中，并在这些插有探头的产品中加入或捆绑适当的生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌。然后将它们放在下述位置

由热穿透试验确定的冷点位置（至少1支）；

由热穿透试验确定的热点位置（1支）；

灭菌柜温度控制探头附近（1支）；

其它位置平均分配。

③试验运行

按预定的灭菌程序如 ℃× min进行灭菌，运行过程中T9温度验证系统会自动记录各测点温度并计算F0值。

注：灭菌产品每一装载方式的热穿透和生物指示剂试验至少应连续进行3次。

④微生物培养

将样品编好号，按温度探头分布图放入灭菌柜腔内。同满载热穿透同时进行。

灭菌后的生物指示剂置50℃～60℃培养24h～48h另取一支做为阳性对照。

⑤结果评价

每种装载方式下，实验结果达到Z冷点灭菌物品的F0值不小于该灭菌程序的设定值（一般情况下F0≥12）；

阳性对照培养24小时，应由紫色变为黄色可判为指示剂有效，否则试验无效；三组共48支灭菌后生物指示剂应全部保持紫色为灭菌合格，若有紫色变黄色为灭菌不合格。

“紫色”表示指示管显示阴性；“黄色”表示指示管显示阳性。