家禽类食物中残留四环素类抗生素的快速液相色谱检测
时间:2017-12-15 阅读:2650
使用伍丰EX1700超快速液相色谱系统对市面销售的鸡肉中残留的四环素进行检测,效果良好:对土霉素、四环素、金霉素的加样回收率在80%以上。
一、实验条件
1.实验试剂
标准品四环素、土霉素、金霉素均购自德国EhrenstorferQuality公司;甲醇、乙腈(色谱纯)购自德国Meker公司;一水柠檬酸(AR)、二水柠檬酸三钠(AR)、三氯乙酸(AR)和二水合草酸(AR)均购自上海润捷化学试剂有限公司;自制超纯水。
2. 实验条件
仪器:伍丰EX1700超快速液相色谱系统
色谱柱:UHPLC XB-C18 (1.8μm ,50 mm×4.6 mm i.d.)
柱温:25℃
进样量:25 μl
流速:1.0 ml/min
流动相:乙腈:甲醇:0.03 M草酸=17:8:75
检测波长:350 nm
3. 实验样品的前处理
3.1 样品提取
用电子天平准确称取绞好的鸡肉5 g,分别加入体积分数20%的三氯乙酸溶液2 mL,pH=4的柠檬酸缓冲液20 mL,加入5 ug/mL混合标样100uL,机械混合10min,4 ℃、8000 r/min离心20 min,取上清液。
3.2样品萃取
Strata C-18E (500mg,3ml)(购自美国Phenomenex公司),先加5 mL甲醇活化,后加5 mL超纯水平衡,再取20 mL上清液上样,接着用10 mL 5%甲醇溶液淋洗,zui后用10mL 0.01mol/L的草酸-甲醇溶液洗脱并收集,60 ℃氮气吹干为止,1mL甲醇溶解,过0.45 μm滤膜,滤液供测定用。
二、实验结果
1 鸡肉中四环素类药物检测(添加水平0.1mg/kg)液相色谱图
添加水平:0.1mg/kg
1—土霉素;2—四环素;3—金霉素
2 鸡肉中四环素类药物检测(空白)液相色谱图
鸡肉空白
3 添加回收结果
三、 结论
按照上述方法对鸡肉中的土霉素、四环素及金霉素在伍丰EX1700上的超快速液相色谱分析检测,加样回收率在80%-90%之间,可以满足鸡肉中上述四环素的含量分析。