酶(热启动酶)

酶(热启动酶)

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2017-07-12 12:35:14
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上海闪晶分子生物科技有限公司

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产品简介

酶用途

主要用于 PCR 扩增和一步法 RT - PCR ;特别适合临床 PCR 诊断试剂,这样可以降低运输条件和降低对临床操作人员的要求。

详细介绍

酶特征

•  克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后,经过化学修饰,再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。

•  在常温下没有聚合酶的活性,需经过 95 ℃ 4mins 的高温造成化学修饰基团的脱落,然后才有聚合的活性;这样就避免在低温阶段的非特异性扩增;大大提高了 PCR 反应的灵敏度和特异性。随着 PCR 扩增的进行,酶活性会被逐步释放,这样就有效提高扩增效率及产物量。

•  具有 5' 到 3 ‘合成 DNA 的能力;无 3 '到 5 ‘外切酶的活性。

•  具有 5 ' 到 3 ‘外切酶的活性, 可用于实时荧光 PCR 

•  具有 3 ‘端加 A 的功能,产物经纯化后可直接用于 T - A 克隆。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS - PAGE 检测,纯度> 95% 。

•  延伸温度 72 ℃ , Mg 2+ 浓度 1.5mM  dNTPS 浓度 0.2mM , 延伸速度为 2000base/min 。

单位定义

在 74℃ 条件下, 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为: 50mM Tris-HCl (pH8.3 , 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。

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