染料法支原体污染实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma contamination

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

货号：Myco-qs-20，规格：20个反应

储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1， 对柔膜菌纲（包括支原体、螺原体和无胆甾原体）有极-强的特异性，与柔膜菌纲以外的其他基因组无交叉反应。

2， 灵敏度高，最-低可检出反应液中2-4个基因组。

3， 使用热启动的Taq酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4， 带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性，也可用于验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。

5， 带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

支原体(Mycoplasma)属于柔膜菌（Mollicutes）纲,也有称为霉形体、霉浆菌或微浆菌，直径约0.1-0.3 µm,具有变形能力，因此可以轻易穿过常规的0.22 µm无菌滤膜,是常见的动物细胞培养污染源。由于支原体体积太小，在光学显微镜下不可分辨，因此细胞常常在不知不觉中被污染。

目前的经典检测方法是欧洲药典（European Pharmacopeia）2.6.7规定的体外培养法，用特殊培养基对支原体进行培养，以此检测污染情况。培养法的优点是检测灵敏度高，缺点是耗时较长，最长的需要28天之久，而且受操作人员的技能水平影响较大，不同实验室的检测误差较大。随着生物制药业的发展，很多生物制品保质期较短，因此需要一种快速、灵敏并且特异性强的支原体检测方法。欧洲药典因此接纳了核酸检测方法作为培养法的替代方案。定量PCR法可以在几个小时内完成检测，灵敏度与培养法相当，甚至更好。

本试剂盒以16S rRNA基因为靶点，设计了多对引物，可检出绝大部分已知的支原体，以及部分螺原体和无胆甾原体，与亲缘关系较近的革兰氏阳性菌，如链球菌、梭菌、乳杆菌等，没有交叉反应，在检测范围和特异性方面达到欧洲药典的要求。欧洲药典提及的所有支原体均在本试剂盒的检测范围内。灵敏度方面，最-低检测值可以达到每个反应2-4个基因组，在不考虑DNA提取损耗的情况下，达到欧洲药典要求的10 CFU/mL的最-低检测值。本试剂盒可作为支原体通用检测试剂盒使用，但不适用于嗜血支原体的检测。

本试剂盒包含热启动Taq酶、dNTP（以UTP代替了TTP）、引物、阳性对照品、SYBR Green I染料、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG，用户只需准备好DNA样品即可使用。

注意事项：

1，  本产品仅限于科研使用，不作诊断用途。

2，  操作过程中应注意防范样品之间的串联污染。建议对工作区域进行划分，将不同步骤，如DNA提取和PCR反应液的配制，分开在不同阶段不同区域进行。使用无污染的一次性枪头，建议用带滤芯的枪头。建议在通风区域操作，操作时须佩戴无粉尘手套。

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