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笃玛 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 试剂盒 产品信息
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3. 血清:使用不含热原和毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分
离。
4. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
5. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
6. 组织匀浆:将组织加入适量理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
7. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
公司秉承价格低,品质*,客户之上的原则努力将优秀的科学产品提供给广大的科研工作者。
笃玛 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 试剂盒 产品信息
常用标签包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白;其纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋
白。
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白的吸附纯化。由于分子量小,且较容易分离和
纯化,是目前使用较广泛的一种。
GST标签体系具有蛋白表达率高,表达产物纯化方便,利于GST抗体制备的特点。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可从细菌裂解液中提取,
在不变性的条件下通过亲和层析得到。
GFP或其突变体EGFP等广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分别。GFP抗体不经可以检测
GFP或其适当的突变体,也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达、细胞定位,以及纯化、定性或定量检测GFP融合表达
蛋白等。
Myc标签(序列为:EQKLISEEDL)已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫
细胞和哺乳细胞中的表达情况。Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到活化的琼脂糖上而进行亲和纯化。但Myc重组蛋白的低pH洗脱条
件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。
HA标签系统利用一个HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系
统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛运用。
MBP标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋
白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。
其余标签抗体还有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV
、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但应
用相对较少。
笃玛 牛脂蛋白a(LP-a) ELISA 试剂盒 产品信息
样品准备
1. 手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量
2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管
3. (选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎组织
5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6. 加入预冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 涡旋震荡5秒,充分混匀
8. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约40至80下)
9. 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
10. 放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升离心管
12. 加入xx微升 稳定液(Reagent B),混匀