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单克隆抗体:
1.概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用:
(1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
(2)药物导向治疗:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导”
(3)分离和纯化抗原分子。单抗的制备过程:
1.动物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞:与培养好的骨髓瘤细胞混合,人工诱导细胞融合。
3.细胞融合:淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选:HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。(含次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一种培养基,其中三种成分与细胞DNA合成有关,骨髓瘤细胞遗传缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培养杂交瘤细胞:体外培养杂交瘤细胞,从培养液中分离提取单克隆抗体。或者,将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内,从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化。
英文名称Anti-ApoM/ApolipoproteinM科研
中文名称 载脂蛋白M抗体
别 名 Apo M; Apo-M; Apolipoprotein M; ApoM; APOM_HUMAN; G3A; HSPC336; MGC22400; NG20; NG20 like protein; Protein G3a.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 新陈代谢
蛋白分子量 predicted molecular weight: 21kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ApoM/Apolipoprotein M
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
单抗原理:
抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成多克隆,并合成多种抗体。如果能选出一个一种专一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 50次Fructus tsaoko草果PCR鉴定试剂盒 负20度 一年2-4周 低温
人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒替沃噻吨标准品
6酮前列腺素检测试剂盒Andrographolide*螺内酯相关物质A标准品螺内酯相关物质A标准品48T/96T细胞株1x10^6cells
Anti-ApoM/ApolipoproteinM科研Factor VIII 第八因子抗体进口/国产人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
Noggin 指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体进口/原装小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
维生素D2检测试剂盒中药对照药材进口/原装双羟萘酸噻嘧啶标准品双羟萘酸噻嘧啶标准品48T/96TCRL-2594
维生素D3检测试剂盒中药对照药材进口/分装磺胺嘧啶银标准品磺胺嘧啶银标准品48T/96THTB-22
GGT1/CD224 γ谷氨酰转移酶抗体进口/分装大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit,48T/96T
维生素D受体检测试剂盒中药对照药材*盐酸大观霉素标准品盐酸大观霉素标准品48T/96THTB-26
TAGL2/TAGLN2 细胞骨架相关蛋白2抗体*人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA Kit,48T/96T
维生素E检测试剂盒中药对照药材进口/国产薄荷醇标准品薄荷醇标准品48T/96THTB-129
单抗制备过程:
1.提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞(不能在体外生长)。
2.应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。
3.对杂交瘤细胞进行细胞培养,选出所需要的细胞群,并进行克隆化培养,得到稳定的杂交瘤细胞,再进行大规模培养获得单克隆抗体。
4.提纯,一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化