其他品牌 品牌
代理商厂商性质
上海市所在地
本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632178 | 单宁酶(TAN)测试盒(比色法) | 100管/48样 |
AS632178 | 单宁酶(TAN)测试盒(比色法) | 50管/24样 |
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase,EC 3.1.1.20),它可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键,生成没食子酸和葡萄糖。
测定原理
使用抗氧化剂没食子酸丙酯(PG)作为单宁酶酶促反应的底物,在270nn下测定底物PG反应前后的光密度变化,计算单宁酶酶活力。
需自备的的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制
试剂一:液体100mL×2瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前每支加入6mL试剂一,充分溶解后备用;用不完的试剂4℃保存;
粗酶液提取
按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
液体样本:直接取上清测定。
测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长到270 nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称(μL) | 对照管 | 测定管 |
95℃水浴5min后灭活的粗酶液 | 50 | |
粗酶液 | 50 | |
试剂二 | 50 | 50 |
混匀,40℃准确保温10 min后,置95℃水浴中10 min(盖紧,防止水分散失),冷却
试剂一 | 900 | 900 |
混匀,取200uL至微量石英比色皿或96孔UV板中,270nm处读取各管吸光值。计算ΔA=A对照-A测定。每个测定管需设个一个对照管。
注意:
可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。
务必使用96孔UV板(非普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。
TAN活力单位的计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 0.0058x + 0.0044,R2 = 0.9994;x为PG含量(µmol/L),y为吸光值。
按样本体积计算
单位的定义:40℃下每毫升粗酶液每分钟水解减少0.01µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位。
TAN活性(µmol/min/mL)=(ΔA-0.0044)÷0.0058÷1000×V反总÷0.01÷V样÷T
=34.48×( ΔA-0.0044)
2、按照蛋白浓度计算
单位的定义:40℃下每毫克蛋白每分钟水解减少0.01µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位(U)。
TAN活性((µmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044)÷0.0058÷1000×V反总÷0.01÷(V样×Cpr)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044)÷Cpr
3、按照样本鲜重计算
单位的定义:40℃下每克样品每分钟水解减少0.01µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位(U)。
TAN活性(µmol/min/g 鲜重)=(ΔA-0.0044)÷0.0058÷1000×V反总÷0.01÷(V样÷V样总×W)÷T
=34.48×(ΔA-0.0044)÷W
V反总:反应体系总体积,1mL; V样:加入样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,10min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 0.0029x + 0.0044,R2 = 0.9994;x为PG含量(µmol/L),y为吸光值。
1、按样本体积计算
单位的定义:40℃下每毫升粗酶液每分钟水解减少0.01µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位(U)。
TAN活性(µmol/min/mL)=(ΔA-0.0044)÷0.0029÷1000×V反总÷0.01÷V样÷T
=68.97×( ΔA-0.0044)
2、按照蛋白浓度计算
单位的定义:40℃下每毫克蛋白每分钟水解减少1µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位(U)。
TAN活性(µmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044)÷0.0029÷1000×V反总÷0.01÷(V样×Cpr)÷T
=68.97×( ΔA-0.0044)÷Cpr
3、按照样本鲜重计算
单位的定义:40℃下每克样品每分钟水解减少0.01µmol底物PG所需要的酶量定义为一个酶活单位(U)。
TAN活性(µmol/min/g 鲜重)=(ΔA-0.0044)÷0.0029÷1000×V反总÷0.01÷(V样÷V样总×W)÷T
=68.97×( ΔA-0.0044)÷W
V反总:反应体系总体积,1mL; V样:加入样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,10min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
公司正在出售的产品:
Lipase ELISA Kit | Ⅳ型前胶原氨基末端肽ELISA试剂盒 |
anti-hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit | B细胞分化因子ELISA试剂盒 |
ATP结合盒转运蛋白G1ELISA试剂盒 | Citron蛋白ELISA试剂盒 |
CD134分子ELISA试剂盒 | EB病毒核抗原3A抗体ELISA试剂盒 |
大鼠磷suan化蛋白激meiC(P-PKC)ELISA Kit | 大鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒 ELISA |
乙酰辅meiAELISA试剂盒 | 鸡传染性鼻炎抗体(IC)试剂盒elisa |
人白介su1(IL-1)检测试剂盒elisa | Cullin4B蛋白ELISA试剂盒 |
猪透明质suan(HA)elisa试剂盒 | 转轮蟹通用PCR试剂盒 |
海豹分枝杆菌PCR试剂盒 | 铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌 核suan检测试剂盒 |
巨睾前殖吸虫PCR试剂盒 | 鼠肺炎病毒RT-PCR试剂盒 |
斯氏分枝杆菌PCR检测试剂盒 | 汉滩型汉坦病毒RT-PCR试剂盒 |
同羊疱疹病毒型羊关联恶性卡他热病毒PCR检测试剂盒 | IVIgG大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒 |
BDNF 小鼠脑源性神经营养因子ELISA检测试剂盒 | 海水派琴虫PCR试剂盒 |
Bcl2拮抗/杀伤因子1(BAK1)ELISA试剂盒 | 同禽疱疹病毒型鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测试剂盒 |
衣原体蛋白样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒 | B7-H4ELISA试剂盒 |