其他品牌 品牌
代理商厂商性质
上海市所在地
NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒
¥320NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒
¥280乳酸脱氢酶(LDH)测试盒(比色法)
¥170NAD激酶(NADK)测试盒(比色法)
¥600辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒(比色法)
¥500抗坏血酸氧化酶(AAO)测试盒(比色法)
¥520硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒
¥250乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒(比色法)
¥420甲醛脱氢酶(FDH)测试盒(比色法)
¥500乙醇脱氢酶(ADH)测试盒(比色法)
¥280柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)
¥1200NADH氧化酶(NOX)测试盒(比色法)
¥450本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632121 | NAD苹果酸酶(NADME)测试盒 | 100管/96样 |
AS632121 | NAD苹果酸酶(NADME)测试盒 | 50管/48样 |
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
测定原理:
NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1瓶,4℃保存。;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;
样本的前处理:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
检测工作液的配制:用时在试剂三中加入15mL试剂一和1mL蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
测定前将检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。
4、在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、55μL试剂二和160μL工作液,混匀后立即记录340nm处初始吸光值A1和 1min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。
注意:如果ΔA<0.005,可将反应时间延长到2分钟或5分钟。
NAD-ME活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T= 3617×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T = 3617×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T =7.234×ΔA
V反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样) ÷T= 7234×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×W) ÷T = 7234×ΔA÷W
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×500) ÷T =14.468×ΔAV反总:反应体系总体积,2.25×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;500:细菌或细胞总数,500万。
公司正在出售的产品:
MMP-9 ELISA Kit | 37kDa核孔蛋白ELISA试剂盒 |
anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit | Anoctamin1蛋白ELISA试剂盒 |
ⅩⅣ型胶原ELISA试剂盒 | B细胞活化因子受体ELISA试剂盒 |
Attractin蛋白ELISA试剂盒 | Cullin3蛋白ELISA试剂盒 |
大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1) ELISA检测试剂盒 | 大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA检测试剂盒 |
17酮皮质类固醇ELISA试剂盒 | 猪白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒elisa |
人淋巴毒suβ(LTB)检测试剂盒elisa | CD146分子ELISA试剂盒 |
猪促胃液su受体(GsaR)elisa试剂盒 | 犬链球菌PCR试剂盒 |
刚地弓形虫PCR试剂盒 | 伪中间型葡萄球菌PCR检测试剂盒 |
肉芽肿性曼氏杆菌病PCR试剂盒 | suan枣仁探针法PCR鉴定试剂盒 |
马立克氏病病毒型PCR检测试剂盒 | 枸杞子探针法PCR鉴定试剂盒 |
赤点石斑鱼神经坏死病毒PCR检测试剂盒 | ISR-β 大鼠胰岛su受体βELISA检测试剂盒 |
ATP结合盒转运蛋白A4(ABCA4)ELISA试剂盒 | 高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒 |
ATM 人毛细血管扩张性共济失调突变基因ELISA检测试剂盒 | 微生物致病菌PCR快速检测系列 |
胰腺再生蛋白Iα(REG1α)ELISA试剂盒 | ASP 人A组链球菌菌壁多糖抗体ELISA检测试剂盒 |