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本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632198 | 植物铵态氮测试盒(比色法) | 100管/96样 |
AS632198 | 植物铵态氮测试盒(比色法) | 50管/48样 |
测定意义
氮素是构成生物体的一种必需元素,自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮,经过硝化微生物的作用转化成硝态氮,后者被植物或微生物同化成有机氮化物,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
测定原理
α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热,经氧化脱氨变成相应的α-酮酸,酮酸进一步脱羧变成醛,水合茚三酮则被还原,在弱酸环境中,还原型茚三酮,氨和另一分子水合茚三酮反应, 缩合生成蓝紫色物质,在580nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体9mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1.5mL蒸馏水充分溶解。
试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存。
样本处理
按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,室温匀浆后于25℃,12000g离心10min,取上清待测。
测定操作表
空白管 | 测定管 | |
样本(μL) | 60 | |
蒸馏水(μL) | 60 | |
试剂一(μL) | 90 | 90 |
试剂二(μL) | 15 | 15 |
充分混匀,沸水浴5min后自然冷却10min | ||
试剂三(μL) | 150 | 150 |
充分混匀,取200μL于微量石英比色皿/96孔板中测定580nm处吸光值A,△A=A测定管-A空白管 |
注意:空白管只需测定一次。
计算公式
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.1535x-0.0279,R2=0.9993
NH4+—N含量(μg/g 鲜重)=(△A+0.0279)÷ 0.1535×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 32.9×(△A+0.0279)÷W
V反总:反应总体积,0.315mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.06mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0768x-0.0279,R2=0.9993
NH4+—N含量(μg/g 鲜重)=(△A+0.0279)÷ 0.0768×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 65.8×(△A+0.0279)÷W
V反总:反应总体积,0.315mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.06mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
注意事项
提取好的待测液尽快测定,低温保存不得超过24小时。
沸水浴时间不宜过长,否则会对测定结果有影响。
显色后20min内完成测定。
检出限为18μg/g。
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