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货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632194 | 水土中亚硝酸盐含量测试盒(比色法) | 100管/96样 |
AS632194 | 水土中亚硝酸盐含量测试盒(比色法) | 50管/48样 |
测定意义:
亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中,不仅是有机氮分解的重要中间产物,也可能来自污染。人体摄入过量后,可诱发消化系统癌变。
测定原理:
在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,室温保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理:
土壤样品:准确称取过筛后的土壤约0.2g,加入1 mL 提取液,室温震荡1h,8000g,25℃离心15min,静置,待其分层后,取上清液待测。
水样:直接检测;如果浑浊,可以离心后再测定。
测定步骤和操作表:
分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
操作表
测定管 | 空白管 | |
提取液(µL) | 70 | |
样品(µL) | 70 | |
试剂一(µL) | 65 | 65 |
试剂二(µL) | 65 | 65 |
混匀,25℃静置15min,于微量石英比色皿/96孔板中检测540nm处吸光值A。 △A=A测定 - A空白 |
注意:空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算:
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x为标准品亚硝酸浓度(μg/ml) y为吸光值A。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V样÷(V样÷V样总×W)×0.6668
=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V样总:加入提取液体积,1.5 mL; V样:反应中样品体积,0.07mL;W:样品质量,g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为:y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991 x为标准品亚硝酸浓度(μg/ml) y为吸光值A。
NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V样÷(V样÷V样总×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×(△A-0.0002)÷W
V样总:加入提取液体积,1.5 mL; V样:反应中样品体积,0.07mL;W:样品质量,g。
注意事项:
试剂盒2-8℃保存。
试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.09浓缩,A540 > 1.5 适当稀释)。
检出限为0.5μg/g。
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