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本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632193 | NO含量测试盒(比色法) | 100管/96样 |
AS632193 | NO含量测试盒(比色法) | 50管/48样 |
测定意义:
NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加热震荡15min)
样品处理:
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。
体液和培养液等其它液态样品:直接测定。
测定步骤和操作表:
分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至550nm。
操作表
空白管 | 测定管 | |
样品(μL) | 100 | |
提取液(μL) | 100 | |
试剂一(μL) | 50 | 50 |
试剂二(μL) | 50 | 50 |
混匀,室温静置15min,于微量石英比色皿/96孔板,测定A550,ΔA=A测定-A空白 |
NO含量计算:
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986
1、组织样品:
(1)按样本质量计算
NO含量(μmoL/g 鲜重)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3
= 0.125×(ΔA +0.0103)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样×Cpr)×10-3
= 0.125×(ΔA +0.0103)÷Cpr
2、细胞:
NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×10-3
= 0.125×(ΔA +0.0103)÷细胞数量(万个)
3、其他样品:
NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.016×V反总÷V样
= 125×(ΔA +0.0103)
V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样品体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr:蛋白浓度,mg/mL
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为:y= 0.008x - 0.0103,R2= 0. 9986
1、组织样品:
(1)按样本重量计算
NO含量(μmoL/g 鲜重)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3
= 0.25×(ΔA +0.0103)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
NO含量(μmoL/mg prot)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反总÷(V样×Cpr)×10-3
= 0.25×(ΔA +0.0103)÷ Cpr
2、细胞:
NO含量(μmol/104 cell)=(ΔA +0.0103)÷0.008×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)×10-3
= 0.25×(ΔA +0.0103)÷细胞数量(万个)
其他样品:
NO含量(μmoL/L)=(ΔA +0.0103)÷0.008× V反总÷V样= 250×(ΔA +0.0103)
V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样品体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr:蛋白浓度,mg/mL
公司正在出售的产品:
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anti-M2-cholinergic receptor antibodies ELISA Kit | CCAAT增强子结合蛋白γELISA试剂盒 |
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