其他品牌 品牌
代理商厂商性质
上海市所在地
本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS632187 | 硝酸还原酶(NR)测试盒(比色法) | 100管/48样 |
AS632187 | 硝酸还原酶(NR)测试盒(比色法) | 50管/24样 |
测定意义
NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
诱导剂储备液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,-20℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用);
试剂四:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂五:标准储备液1mL,-20℃保存。
诱导剂应用液的配制:用时将诱导剂储备液稀释10倍,即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水,充分混匀。
0.1umol/mL的标准液的配制:用时将试剂五稀释100倍,即取 0.1ml试剂五加9.9mL蒸馏水,充分混匀。
样本前处理
动植物组织样品的前处理:
(1)取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡2h,取出样本,滤纸吸干。
(2)按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
注意:
建议使用新鲜没有冷冻过的样本。
一般不要诱导处理,预测定结果没有活性(A测定≤A对照管)则需要诱导处理。
细菌或培养细胞的前处理:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在EP管或96孔板中加入下列试剂)
试剂名称(μL) | 加样孔 | |||
测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 | |
样本 | 20 | 20 | ||
0.1μmol/mL标准液 | 20 | |||
蒸馏水 | 75 | 95 | ||
试剂一 | 75 | 75 | ||
试剂二 | 25 | 25 | 25 | 25 |
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)反应30min
试剂三 | 50 | 50 | 50 | 50 |
试剂四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
混匀,25℃室温显色20min,540nm处比色
注意:1、标准管和空白管只需测一次,每个测定管设一个对照管。
2、诱导处理后的样本对照管中试剂二改成加25μL蒸馏水。
NR活性计算:
(1)按样本鲜重计算:
单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR(μmol/h/g 鲜重)= (C标准管×V1)×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=0.2×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol NO2ˉ的量为一个 NR活力单位。
NR(μmol/h/mg prot)=(C标准管×V1)×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=0.2×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr
C标准管:标准管浓度,0.1μmol/mL;V1:加入样本体积:0.02mL;V2:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
公司正在出售的产品:
VGCC ELISA Kit | ADAM金属肽mei含血小板反应蛋白1基元4ELISA试剂盒 |
Anti-interferon antibody(Anti-IFN-ab)ELISA Kit | B细胞受体ELISA试剂盒 |
Bcl2关联永生基因3ELISA试剂盒 | Codanin1蛋白ELISA试剂盒 |
CD276分子ELISA试剂盒 | Epiprofin蛋白ELISA试剂盒 |
大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 ELISA | 大鼠γ干扰su诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA检测试剂盒 |
肌动蛋白γ1ELISA试剂盒 | 鸡热休克蛋白60(Hsp-60)试剂盒elisa |
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)检测试剂盒elisa | CytospinA蛋白ELISA试剂盒 |
猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa试剂盒 | 淋病奈瑟菌PCR试剂盒 |
海藻巴斯德菌PCR试剂盒 | 同禽腺病毒型鹌鹑支气管炎病毒PCR检测试剂盒 |
瑞氏绦虫通用PCR试剂盒 | 匙状毛样线虫PCR试剂盒 |
犬血支原体PCR检测试剂盒 | 河豚鱼源性成分PCR试剂盒 |
阿尔莱特葡萄球菌PCR检测试剂盒 | AChRab 大鼠乙酰受体抗体ELISA检测试剂盒 |
bFGF-6 小鼠碱性成纤维细胞生长因子6ELISA检测试剂盒 | 汉氏巴尔通体PCR检测试剂盒 |
bFGF 人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒 | 同马疱疹病毒型马疹病病毒PCR检测试剂盒 |
叶suan受体(FOLR)ELISA试剂盒 | Bcl-2 大鼠B细胞淋巴瘤因子2ELISA检测试剂盒 |