淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)
淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)
淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)
淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)

AS6321212淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)

参考价: ¥900~¥1700

具体成交价以合同协议为准
2023-10-14 19:59:47
4146
属性:
产地:国产;规格:100管/48样、50管/24样;级别:其他;
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规格:
100管/48样;50管/24样;
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产品属性
产地
国产
规格
100管/48样、50管/24样
级别
其他
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淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)

参考价: ¥900~¥1700

100管/48样 1700元 15 盒可售
50管/24样 900元 15 盒可售
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。

详细介绍

本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。

货号

产品名称

规格

AS6321212

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)

100管/48样

AS6321212

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒(比色法)

50管/24样

测定意义

DBE能够专一性地裂解支链淀粉的α-1,6糖苷键,产生线性的葡萄糖链,在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。

测定原理

采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前每支加入6mL试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂三:液体12mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体35mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取 

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称(μL)

对照管

测定管

95℃水浴5min后灭活的样本

100


粗酶液


100

试剂一

100


试剂二


100

混匀,37℃准确保温2h

试剂三

100

100

试剂四

300

300

混匀,95℃水浴5min,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,540nm处读取各管吸光值。ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设个一个对照管。

注意:可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。

DBE活力单位的计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件测定回归方程为y = 3.8458x - 0.165;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

(1)按照蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每h催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /mg prot)=[ (ΔA+0.165)÷3.8458×V反总]÷(V样×Cpr)÷T

=0.26× (ΔA+0.165) ÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /g鲜重)=[ (ΔA+0.165)÷3.8458×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T

=0.26× (ΔA+0.165) ÷W

V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

 

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件测定回归方程为y = 1.9229x - 0.165;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

(1)按照蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每h催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /mg prot)=[ (ΔA+0.165)÷1.9229×V反总]÷(V样×Cpr)÷T

=0.52× (ΔA+0.165) ÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /g鲜重)=[ (ΔA+0.165)÷1.9229×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T

=0.52× (ΔA+0.165) ÷W

V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

标准曲线线性范围为0.1mg/mL-1mg/mL。

ΔA线性范围为0.01-1。

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