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货号 | 产品名称 | 规格 |
AS6321199 | 血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒 | 100管/96样 |
AS6321199 | 血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒 | 50管/48样 |
测定意义
高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的胆固,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫”,对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。
测定原理
用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固,利用酯酶催化胆固酯水解生成游离胆固和游离脂肪酸,从而把胆固酯转化为FC;进一步利用胆固氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加5mL试剂四充分溶解。
试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。
标准品:液体1mL×1支,4℃保存。
样品处理
取血后3小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照1:1的比例充分混匀,25℃静置15min,2000g离心15min,上清置于冰上待测。
测定操作表
空白管 | 标准管 | 测定管 | |
蒸馏水(μL) | 4 | ||
标准品(μL) | 4 | ||
样本(μL) | 4 | ||
试剂二(μL) | 150 | 150 | 150 |
试剂三(μL) | 50 | 50 | 50 |
混匀,37℃静置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管调零,测定500nm处吸光值A。分别记为A标准管和A测定管 |
计算公式
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管
=5×A测定管÷A标准管
C标准管:5mmol/L
b.用96孔板测定的计算公式如下
HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管
=5×A测定管÷A标准管
C标准管:5mmol/L
注意事项
样本切勿反复冻融,最好在取血后12小时内完成测定。
配置好的试剂三4℃保存可半个月。
线性范围为0.15mmol/L-3.8mmol/L。
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