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本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
货号 | 产品名称 | 规格 |
AS6321257 | 半纤维素含量测试盒(比色法) | 100管/96样 |
AS6321257 | 半纤维素含量测试盒(比色法) | 50管/48样 |
测定意义
半纤维素是植物细胞壁中与纤维素紧密结合的多糖混合物,是构成细胞初生壁的主要成分,广泛存在于植物中,是一种新型可利用能源。
测定原理
半纤维素经酸处理后转化成还原糖,与DNS生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纤维素含量。
需自备的仪器和用品、
天平、40目筛,恒温水浴锅、烘箱、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板
试剂组成和配制
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理
样品80℃烘干至恒重,粉碎,过40目筛。
测定操作表
空白管 | 测定管 | |
样本(g) | 0.02 | |
试剂一(μL) | 1000 | |
90℃水浴10min,25℃,8000g离心10min,弃上清 | ||
蒸馏水(μL) | 1000 | |
充分混匀,25℃,8000g离心10min,此步骤重复3次,取沉淀105℃,烘干至恒重 | ||
试剂二(μL) | 200 | 200 |
90℃水浴1h,自然冷却 | ||
试剂三(μL) | 200 | 200 |
混匀,25℃,8000g离心10min | ||
上清(μL) | 60 | 60 |
试剂四(μL) | 45 | 45 |
蒸馏水(μL) | 195 | 195 |
充分混匀,90℃水浴5min,自然冷却,25℃,8000g离心10min | ||
取200μL上清液于微量石英比色皿/96孔板,测定540nm处吸光值A。分别记为A空白管和A测定管,ΔA=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。 |
计算公式
用微量石英比色皿计算公式如下:
1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.3968x+0.0306,R2=0.9961;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
2、半纤维素含量(mg/g 干重)=(△A-0.0306)÷ 0.3968÷(W÷V样总)
= 1.01×(△A-0.0306)÷W
b.用96孔板计算公式如下:
1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.1984x+0.0306,R2=0.9961;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
2、半纤维素含量(mg/g 干重)=(△A-0.0306)÷ 0.1984÷(W÷V样总)
= 2.02×(△A-0.0306)÷W
W:样品质量,g;V样总:加入提取液体,0.4mL。
检测限为1mg/g。
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