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货号 | 产品名称 | 规格 |
AS6321297 | 土壤过氧化物酶(SPOD)测试盒(比色法) | 100管/96样 |
AS6321297 | 土壤过氧化物酶(SPOD)测试盒(比色法) | 50管/48样 |
测定意义:
S-POD主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。
测定原理:
S-POD催化有机物质氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、乙50mL(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前取一瓶,加入6mL蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存一周。
试剂二:液体2.5mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:乙50mL×1瓶,4℃保存;(自备)
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至430nm,蒸馏水调零。
加样表
试剂名称 | 测定管 |
风干土样(g) | 0.02 |
试剂一(μL) | 100 |
试剂二(μL) | 20 |
振荡混匀,30℃恒温培养1 h
试剂三(μL) | 50 |
试剂四(μL) | 430 |
振荡数次,25℃室温静置30min,吸取200μL上层液于430nm处测定吸光值A
(注意:1、因乙粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗2~3次,再转移测定;2、乙易挥发,转移到96孔板后立即测定,最好一个一个测定)。
S-POD活力计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 8.97x -0.003;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值A。
单位的定义:每天每g土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-POD活力(mg/d/g 土样)=(A+0.003) ÷8.97×V反总÷W÷T=80×(A+0.003)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积0.6mL;W:样本质量,0.02g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 4.485x -0.003;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值A。
单位的定义:每天每g土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-POD活力(mg/d/g 土样)=(A+0.003) ÷4.485×V反总÷W÷T=160×(A+0.003)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积0.6mL;W:样本质量,0.02g。
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