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1.在微量反应板每孔加入待检标本50μl,设阳性、阴性对照各2孔,每孔加入阳性(或阴性)对照各1滴,并设空白对照1孔。
2.每孔加入酶结合物1滴(空白对照除外),充分混匀,封板,置37℃孵育30分钟。
3.弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5秒,甩干,重复5次后拍干。
4.每孔加显色剂A液、B液各1滴,充分混匀,封板,置37℃孵育15分钟。
5.每孔加终止液1滴,充分混匀。
6.用酶标仪读数,取波长450nm,先用空白孔校零,然后读取各孔OD值。
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