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丙烯酰胺ELISA检测试剂盒
Acrylamide-ES ELISA Test Kit
PN515680
使用之前要阅读说明书(中文说名书仅供参考请以英文为准)
1.概述
本产品是高灵敏度的用于定量检测丙烯酰胺的酶联免疫检测试剂盒。适用于食物样品中的丙烯酰胺的检测。样品结果可以用HPLC, GC/MS方法验证。
2. 安全性说明
试剂盒含有少量的丙烯酰胺;底物中含有四甲基联苯胺;终止液中含有稀硫酸,避免皮肤和粘膜接触终止液;以上各溶剂不小心滴到皮肤上请用水冲洗。
3. 存储和稳定性
存储:4–8℃
在使用前试剂盒中溶液的温度要恢复到室温(20-25℃)
试剂在有效期内都可以使用。
酶标记丙烯酰胺是冻干的,使用之前按照所需量用蒸馏水溶解,当天使用。标准品和样品检测前需要衍生化并且当天使用。
4.原理
此试剂盒是通过丙烯酰胺抗体来检测丙烯酰胺的。将标准品或者样品加入到微孔中和包被在微孔底部的抗丙烯酰胺的高亲和力抗体发生反应。如果样品中存在丙烯酰胺 ,加入HRP(辣根过氧化物酶)标记物将竞争性的与抗体结合。包被在板底部的二抗与抗体结合,加入洗液洗去未结合的抗原抗体,加入显色底物,在酶的作用下显蓝色。显色颜色的深浅与样品中丙烯酰胺的量成反比例关系。所以,样品中的丙烯酰胺 浓度越高,显色的蓝色将会越浅。加入酸,终止反应,底物颜色由蓝色变为棕黄色。微孔板放进酶标仪里450nm读数,样品的吸光度值与试剂盒中标准OD值相比较,相对应得出结果。
5. 丙烯酰胺ELISA 的缺陷
在样品中出现的很多有机和无机物在检测中是不发生反应的,然而样品中那些易变性的物质产生的基质效应是不可以避免的。在操作中发生错误也能引起误差,比如试剂盒的存储,错误的加液顺序,试剂加入的量不准确,在免疫反应或底物反应中太长或太短的孵育时间,太高或太低的孵育温度。对于阳性样品要用液相或质谱仪做进一步的确认。
6.丙烯酰胺测定的重要性
丙烯酰胺是一种常用工业化学品,每年大约生产20万吨。主要用于建筑上的凝胶剂,造纸和土壤调节剂,废水处理的添加剂。丙烯酰胺作为烟中有毒成分之一,对动物生殖系统影响很大。长时间接触会对人神经系统造成损害。除了工业上用途,丙烯酰胺也是生活中蒸煮的副产物。在超过120°C的烧烤,烘烤,油炸都会引起食物中的天冬氨酸和还原糖如葡萄糖、果糖反应产生丙烯酰胺。含较多碳水化合物的食物在经过高温烧烤和烘烤时会产生大量的丙烯酰胺。在生的或煮熟的高碳水化合物食物和肉中没有发现丙烯酰胺。Abraxis 丙烯酰胺试剂盒点双样的情况下可以检测40个样,只需要很少量的样品,样品需要进行提取和净化步骤,在检测前还要进行衍生化。