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1 概述
莱克多巴胺ELISA免疫检测方法用于定量检测肉中莱克多巴胺的含量。这个试剂盒也可以检测其它样品,但是需要验证。莱克多巴胺是的一种。因为这类化合物可以促进动物脂肪向肌肉转化引起了人们的关注。莱克多巴胺对猪的影响相当明显,其它种族如牛和鱼也表明有相似的效果。很多资料表明的滥用导致的人食物中毒。每个国家的允许的检出限不同。欧洲不允许有残留。美国对于猪肝是1.2 ppm、肌肉是0.05 ppm。如果需要阳性样品可以通过HPLC, GC/MS其它 的传统方法来验证。
2 安全性指导
试剂盒中的标准含有少量的莱克多巴胺。底物中含有TMB。终止液中含有稀硫酸。避免终止液与皮肤和粘膜接触,如果不小心接触了请用大量的水冲洗。
3 储存和稳定性
莱克多巴胺ELISA试剂盒应该保存在4–8°C。在使用前一定要回复到室温(20-25°C)。试剂盒在有效期内都可以使用。
4 原理
原理是竞争酶联免疫检测方法。通过莱克多巴胺特异性抗体来识别莱克多巴胺。样品中的莱克多巴胺和莱克多巴胺酶结合物竞争与兔抗莱克多巴胺抗体的结合位点结合。莱克多巴胺抗体和包被在微孔板上的二抗结合。经过一个洗涤步骤加入底物溶液,发生显色反应(产生蓝色)。蓝色的强度和样品中莱克多巴胺的含量成反比。进过一个特定的时间显色反应被终止。用酶标仪测定。通过绘制标准曲线计算样品中莱克多巴胺的含量。
5 试剂盒的限制和干扰因素
操作不当可能导致检测结果错误,比如:试剂盒保存条件不对、错误的加液顺序、试剂的量没有加准确、孵育的时间太长或太短、孵育的温度太高或太低(低于10°C,高于30°C)。检测猪肉和牛肉样品(用下面样品前处理步骤)的回收率是85-120%。和其它检测方法一样对阳性结果要求通过其它传统的方法来验证。