新品发布| 友好高效的阳离子交换层析介质--MaXtar S HC
时间：2023-12-14 阅读：608
抗体、重组蛋白等纯化过程中，除去蛋白A亲和和阴离子交换外，另一最重要的层析介质就是阳离子交换层析介质。阳离子交换层析介质通常用在纯化中的精纯步骤，以去除HCP等痕量杂质。随着现代研发人员对产品纯化的高要求，使用者对填料提出了高载量和回收率，兼具高选择性的要求。在这种背景下，百林科通过不断努力创新，研发出了具有高载量高分辨率的阳离子交换层析介质-- MaXtar® S HC。
MaXtar® S HC是一款高载量高分辨率的强阳离子交换层析介质，利用不同分子在特定条件下电荷性质和多少的差异对其进行分离。
相比于传统的强阳离子交换层析介质，MaXtar® S HC表现出更优的性能：
(1)改良的MaXtar基架具有更强刚性，因此在较低的反压下能够实现更高工艺流速，提高工艺效率。
(2)通过升级配基偶联方式，在保证分离效果的同时，兼具高动态结合载量。
参数介绍
* 结合载量的测量条件：4.7ml 预装柱，装柱高度：10cm，在保留时间为5分钟时测量10% 穿透时的动态结合能力。测试缓冲液：50mM 醋酸钠，pH 5.5(单克隆抗体)。
** 层析介质在40℃，pH2-14环境下放置7天后，其理化性质和功能没有明显变化。
*** v/v，体积比。
性能表现--高载量
采用CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)作为样品，对MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的DBC(动态结合载量)进行探索，发现：MaXtar® S HC的DBC明显优于MaXtar® SP HR，是其的2倍。实验条件如下：
层析柱：4.7 ml预装柱，装柱高度10 cm，柱体积约4.7 ml
样品：CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)
平衡缓冲液：50mM醋酸钠，pH5.5
洗脱缓冲液：50mM醋酸钠，1M氯化钠，pH5.5
保留时间：5 min
图1. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR 10%穿透(QB10)曲线
表1. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR在QB10的动态结合力
性能表现--高回收率
我们采用0.8的安全系数，进行上样洗脱测试，发现：两款填料的洗脱回收率都可以达到97%以上。实验条件如下：
层析柱：4.7 ml预装柱，装柱高度10 cm，柱体积约4.7 ml
样品：CHO细胞表达的单克隆抗体(精纯后蛋白)
平衡缓冲液：50mM醋酸钠，pH5.5
洗脱缓冲液：50mM醋酸钠，1M氯化钠，pH5.5
保留时间：5 min
图2. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的结合洗脱图谱
表2. MaXtar® S HC和MaXtar® SP HR的纯化结果
DMSO耐受--适用于ADC精纯
MaXtar® S HC浸泡15%DMSO，200 h后，对浸泡前后的DBC(动态结合载量)和检测过程中的压力进行对比，DMSO浸泡后MaXtar® S HC的DBC满足浸泡前的95%以上，同时，浸泡前后压力值均在可接受范围内，无明显压力上升情况。综上所述，MaXtar® S HC层析介质在15%DMSO溶液中200h稳定。
图3. MaXtar® S HC DMSO浸泡前/后10% 穿透(QB10)曲线
表3. MaXtar® S HC DMSO浸泡前/后在QB10的动态结合力
图4. MaXtar® S HC检测过程压力曲线
应用案例
依据单抗料液实际载量的80%进行上样洗脱测试，发现：MaXtar® S HC纯化后样品纯度达99.4%，收率为92.6%，HCP去除效果明显。实验条件如下：
层析柱：4.7 ml预装柱，装柱高度10 cm，柱体积约4.7 ml
样品：阴离子交换层析介质纯化后的单抗料液
平衡缓冲液：50mM醋酸钠，pH5.12
洗脱缓冲液：50mM醋酸钠，1M氯化钠，pH5.11，0~100%B 20CV
保留时间：5 min
图5. MaXtar® S HC的结合洗脱图谱
表4. MaXtar® S HC的纯化结果
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