实验技术—细胞培养板的选择
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样,你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫?你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼?你对如何处理培养板是否也有困惑?对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会?请看丁香园资深站友总结的「细胞培养板的选择」。
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。
平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择
不同形状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用,但当细胞数目较少,如做克隆时,就用96孔平底板;另外,做MTT等实验时,无论贴壁和悬浮细胞,一般均用平底板。这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致,还便于MTT检测。
至于U或V型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触以刺激。因此,一般需要U型板,因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V型板的用途更少,一般用于细胞杀伤实验时,为了使效靶细胞紧密接触,常使用V型板,但这种实验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心)。除此之外,圆底还可以拿來做分析、化学反应、同位素掺入的实验或是保存样品用。
孔数的选择
流式一般用6孔,MTT一般用96孔,细胞爬片一般用24孔等,要具体根据你的实验来定。
细胞培养板主要材料是treatedsufface,便于细胞贴壁生长与伸展。当然还与浮游细胞的生长材料,降低结合表面积有关,取决于实验材料上的应用与对材料的选择。
细胞培养板与酶标板的区别
用多孔细胞培养板测吸光度肯定可以,可以用它来做样品的蛋白定量和MTT检测。
区别:酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,但也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不能用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。
常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量
不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
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