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纯化小技巧 | 组氨酸(His)标签蛋白纯化,怎么做更简单?

百林科医药科技(上海)有限公司 >> 进入商铺

2023/7/6 9:29:07
  往期栏目中我们介绍了Ni Chromstar Excel,是百林科推出的最新一代His标签蛋白亲和填料,不仅耐受100mM EDTA和部分还原剂,而且具有较好的耐碱性能,革新您的纯化工艺,具有明显优势。本期我们将分享Ni Chromstar Excel 进行耐碱性测试的数据,有图有真相!
 
  ►►耐受EDTA
 
  耐受高达100mM EDTA,简化样品前处理, 无需换液操作,应用案例参见纯化小技巧 | 组氨酸(His)标签蛋白不挂柱怎么办?
 
  ►►可直接CIP
 
  无需脱Ni,直接进行0.1M或0.5M NaOH彻底清洗,有效避免交叉污染, 延长使用寿命。
 
  ►►Ni脱落率低
 
  Ni脱落率显著降低,无需反复再生,使用保存更加方便。

图1: Ni Chromstar Excel系列产品

 
  1  氢氧化钠CIP测试--应用案例 

推荐测试条件
 
  •  样品信息:粗纯后的His标签蛋白
 
  •  层析柱:Chrom-Trap Ni Chromstar Excel 1 ml
 
  •  Buffer A: 20mM PB, 0.5M NaCl, pH7.5
 
  •  Buffer B: 20mM PB,0.5M NaCl, 500mM 咪唑, pH7.5
 
  •  洗脱:50% B 等度洗脱

 
图2:0.1M NaOH耐碱性测试图谱

 
图3:0.5M NaOH耐碱性测试图谱
 
  小结:实验数据可见,Ni Chromstar Excel分别经过0.1 M NaOH和0.5 M NaOH累积浸泡24h、48h后载量无明显变化。

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