限度利用2个不同分离系统，实现全2维分离

全二维液相色谱将两种独立的分离系统加以结合，可大幅度地提高分离性能，是全新的分析方法。通过多个分离系统的组合，可以分离使用一维LC难以分离的成分，为此，可应用于复杂样品的分析。另外，与一般的二维LC不同，获取的数据反映出第1维与第2维双方的分离结果，可限度地应用双方的分离系统。

 

复杂样品分离不充分，造成峰重合

将一维分离的成分进一步以第2根色谱柱进行分离， 即使复杂的样品也可实现高分离

通常的1维LC与Comprehensive 2D-LC的差异

 

全二维液相色谱将一维系统的洗脱液在二维谱图上进一步细致地分割解析，在线连续地在二维系统实施分离。通过2个环路的阀构成一维与二维系统相交的流路结构，切换阀使这些环路交替地重复进行一维洗脱液分割和向二维系统注入的动作。

全二维液相色谱系统的流路与动作

在二维谱图上解析各成分

全二维液相色谱分析的优点不仅仅是高分离。在二维谱图上，维轴与第二维轴可分别为不同的分离条件，因此，各成分的物性与图上的位置相关。在二维谱图上进行解析，可对具有类似结构的化合物分组，可直接观察到各成分群，或在图上解析未知成分的性质。

 磷脂39成分的同时分析
PG：磷脂　PE：磷脂酰乙醇胺  PA：磷脂酸
PI：磷脂酰肌醇  PS：磷脂酰丝氨酸　PC：磷脂酰胆碱

磷脂各成分通过第1维正相系统基于极性基团种类进行分离，通过第2维反相系统基于脂肪酸链长进行分离。

上图按种类分组表示各成分。

磷脂有以正离子模式较强检出的成分和以负离子模式较强检出的成分，但利用LCMS-8050的高速正负离子切换［UFswitching］检测，可以在1次分析中获得两组数据。

由拥有性能的Nexera X2构筑

为实现全二维液相色谱，要求各构成组件具有性能。比如，二维分析系统满足超快速梯度分析，即高流量且超高压的送液要求。并且，为了解析样品间的差异，还要求在上述分析条件下具有非常高的保留时间重现性。 Nexera-e采用具有水平的Nexera X2的各组件，具备充分满足上述严苛要求的性能。比如，送液单元LC-30AD可至3 mL/min的高流量区域，并以130 MPa耐压实施送液。与同样可耐压130 MPa的高压流路切换阀FCV-32AH组合，扩大了二维分析系统的选择范围。

Nexera-e 系统（PDA型号）

Nexera-e采用本公司自行开发的低容量流路切换阀。

全二维液相色谱需要频繁的切换流路，因此，如果阀的密封因磨损易产生粉末，则可能在分析中造成流路堵塞等，有可能对分析产生重大影响。流路切换阀FCV-32AH采用了在开发Nexera X2的自动进样器过程中培育优异技术，排除了这种担心。

对于基本上以超快速分析为主的全二维液相色谱来说，检测器的高速采样也非常重要。

Nexera X2的光电二极管阵列检测器SPD-M30A达200 Hz，三重四极杆型质谱仪LCMS-8050也通过采用UFMS技术而实现了超高速扫描，可从容地采集数据。

编号	成分	二维保留时间重现性 ［%RSD］
1	Acetanilide	0.43
2	Methyl paraben	0.37
3	Acetophenone	0.66
4	Propyl paraben	0.43
5	Butyrophenone	0.42
6	Benzophenone	0.35
7	Hexanophenone	0.43

标准品分析中各成分的保留时间重现性（n=6）
（1: Acetanilide, 2: Methyl paraben, 3: Acetophenone, 4: Propyl paraben, 5: Butyrophenone, 6: Benzophenone, 7: Hexanophenone)

二维数据变换与二维数据上的定性・定量解析

数据采集所获得的数据通过全二维液相色谱解析软件ChromSquare变换为二维等高线数据。色谱图上的峰在等高线数据上被识别为点，以这个点为单位进行定性·定量解析处理。

磷脂标准样品的LC×LC/MS数据解析
（左上：等高线图（放大），左下：MS谱图，右上：第2维的色谱图，右下：等高线图（整体）） 

随着指针的移动，显示表示MS谱图。比如，可以对有特征的点简便地使用MS谱图进行定性分析。

与通常的HPLC分析相同，可根据标准样品的分析结果制作标准曲线，根据此标准曲线进行未知样品的定量分析。

※ChromSquare为意大利Chromaleont S.r.l的产品。