基因测序仪工作原理

1. Sanger测序（链终止测序）工作原理：DNA复制：首先，将待测序的DNA片段通过PCR（聚合酶链反应）扩增。终止子添加：在DNA复制过程中，使用带有不同终止子的核苷酸（ddNTPs）。链终止：当ddNTPs加入时，DNA链的合成终止，因为它们没有3羟基，不能与下一个核苷酸连接。电泳分离：将所有新合成的DNA链进行电泳分离。读取序列：通过检测每个DNA链的终止点，可以确定每个核苷酸的序列。2. 测序通量测序（二代测序）工作原理：片段化：将DNA片段化成小片段。文库构建：将片段化的DNA连接到适配体上，形成文库。并行测序：使用荧光标记的核苷酸进行PCR扩增，并在每个循环中读取序列。序列读取：通过检测荧光信号的变化来确定每个核苷酸。常见的二代测序技术包括：Illumina测序：基于测序通量，使用测序芯片，通过荧光信号读取序列。ABI SOLiD测序：使用合成测序，通过检测化学信号读取序列。Ion Torrent测序：使用半导体传感器，通过检测离子流读取序列。3. 单分子测序（三代测序）工作原理：单分子检测：直接在单个DNA分子上进行测序，而不是像二代测序那样先进行片段化。实时监测：在DNA复制或合成过程中实时监测，可以同时读取多个碱基。信号检测：通过检测荧光信号或离子流等来读取序列。

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