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干细胞实验室应至少能够执行六项任务:无菌处理、孵化、制备、清洗、灭菌、存储。
一.无菌操作区
(1)无菌操作区域:无菌操作区域在干细胞实验室中负责细胞培养和其他无菌操作区域,与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。
理想的无菌操作室应分为三个部分:
a)更衣室——更换衣服、鞋子,穿戴帽子和面具。
b)缓冲室 -——位于更衣室和手术室之间,以确保手术室内的无菌环境,并放置恒温培养箱和一些必要的小器械。
c)无菌手术室——于无菌处理、细胞培养。房间大小应适当,顶部不宜过高(不超过2.5m),以确保紫外线的有效杀菌 效果;墙壁光滑,方便清洁和消毒。工作台不应靠墙放置。台面要平滑压塑作表面,涂漆成白色或灰色,以便于观 察解剖结构和酚红。
(2)净化工作台:操作简单,安装方便,占用空间小,净化效果好。在一实验室中主要使用的两种的净化工作台:
a)侧流或垂直式
b)外流或水平层流式。
二.孵化区
尽管该区域对无菌的要求并不比无菌区域严格,但它们仍然需要清洁无尘,因此它们也应放置在干扰少的区域。孵育可以在培养箱中或控制温度的温室中进行,相比之下温室是费用较高,通常实验室多采用培养箱孵育。
三.制备区
在该区域中,主要进行培养液,有关培养用液等实验用品的制备。
四.存储区域
主要存放各种冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,此环境还需要清洁无尘。
五.清洁和消毒区域
清洁和消毒区域应与其他区域分开,主要用于清洁所有细胞培养容器、准备、消毒及三蒸水制造等。