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利用斑马鱼模型评价皮肤光毒性【评价原理】
光毒物质在特定的波长光线刺激下,形成单线态和三线态后,可迅速与细胞小分子物质结合形成特异的光激活物质。这种物质在体内会降解为普通毒物或再次成为光毒物质,对机体造成伤害。在急性光毒性反应中,皮肤在照射紫外线后数分钟至数小时内出现红斑、水疱等。在慢性光毒性中可引起照射处皮肤色素的沉着过多以及皮肤增厚。斑马鱼皮肤包括表皮、真皮和真皮下组织,结构与人高度相似。因此,斑马鱼适合评价化妆品的光毒性。
我们评价斑马鱼光毒性有2个指标:1.毒性表型;2.LC50。
利用斑马鱼模型评价皮肤光毒性【实验方案】
我们将受测试斑马鱼分成12个组,分别是避光正常对照组,5个避光供试品组,光照正常对照组,5个光照供试品组。供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内。
皮肤吸收一段时间供试品后,我们记录斑马鱼各组斑马鱼死亡率,以软件计算供试品LC50;并记录拍照记录明显毒性表型。
【结果展示】
图1:光毒性表型图
可以看到,正常对照组和光照处理正常对照组未诱发任何毒性表型。供试品组诱发卵黄囊吸收延迟,光照处理的供试品组诱发心血管毒性和肾毒性等。
图2. 供试品LC50
可以看到,未光照的供试品与光照过的供试品LC50有明显差异。
【评价结论】
1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,光照过的供试品诱发毒性表型较未光照的供试品严重,且与正常对照组存在明显的差别;未光照的供试品与光照过的供试品LC50有明显差异。
2.本实验证实了供试品具有光毒性。