利用斑马鱼模型评价皮肤刺激性【评价原理】

与人类相似，中性粒细胞在斑马鱼体内发挥固有免疫作用，且是体内数量多的白细胞在炎症反应起始阶段有一系列事件发生，如血管舒张、毛细血管网的通透性增强、炎性介导释放等。化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症，炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。刺激物进入斑马鱼体内，诱导炎症反应，中性粒细胞发生免疫应答，向皮肤表皮迁移并聚集。

采用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，可在荧光显微镜在观察到皮肤受刺激的斑马鱼皮肤上的中性粒细胞明显增多。

利用斑马鱼模型评价皮肤刺激性【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

皮肤吸收供试品一段时间后，我们在显微镜下观察斑马鱼皮肤上中性粒细胞数量（头部、心脏和血管中的中性粒细胞除外）。

【结果展示】

图1. 斑马鱼皮肤刺激性表型图

绿色光点为中性粒细胞，绿色荧光越多，中性粒细胞越多，皮肤刺激性越强

可以看到，供试品组斑马鱼皮肤上中性粒细胞数量明显增加。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，摄入供试品组的斑马鱼皮肤上中性粒细胞明显增多，与正常对照组存在明显的差别。

2.本实验证实了该十二烷基磺酸钠（SLS）和甲基异噻唑啉酮对斑马鱼有皮肤刺激性。