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一步解决细胞培养板选择困扰全程干货

时间:2020-11-30      阅读:82

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样,你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫?你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼?你对如何处理培养板是否也有困惑?对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会?

 

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U 型和V 型);培养孔的孔数有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有 Terasaki 板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

 

平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择

 

不同形状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用,但当细胞数目较少,如做克隆时,就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等实验时,无论贴壁和悬浮细胞,一般均用平底板。这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致,还便于 MTT 检测。

 

至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触以刺激。因此,一般需要 U 型板,因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V 型板的用途更少,一般用于细胞杀伤实验时,为了使效靶细胞紧密接触,常使用 V 型板,但这种实验也可用 U 型板替代(加入细胞后﹐低速离心)。除此之外,圆底还可以拿來做分析、化学反应、同位素掺入的实验或是保存样品用。

 

孔数的选择

 

流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,细胞爬片一般用 24 孔等,要具体根据你的实验来定。

 

Terasaki 板和普通细胞培养板的区别

 

Terasakiplate 主要是用于晶体学研究,产品设计便于对晶体的观察与结构分析。有 sitting 和 handing drop 两种方法。两种方法应用产品的外形结构也不同,材料上选择 crystal class polymer,特殊的材料有利观察晶体结构。

 

细胞培养板主要材料是 treated sufface,便于细胞贴壁生长与伸展。当然还与浮游细胞的生长材料,降低结合表面积有关,取决于实验材料上的应用与对材料的选择。

 

细胞培养板与酶标板的区别

 

用多孔细胞培养板测吸光度肯定可以,可以用它来做样品的蛋白定量和 MTT 检测。

 

区别:酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,但也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不能用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。

 

常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量

 

不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

培养器皿

面积(cm2

培养液量(ml)

细胞量

96 孔培养板

0.32

0.1

105

24 孔培养板

2

1.0

5×105

12 孔培养板

4.5

2.0

106

6 孔培养板

9.6

2.5

2.5×106

3.5 cm 培养皿

8

3.0

2×106

6 cm 培养皿

21

5.0

5.2×106

10 cm 培养皿

55

10.0

13.7×106

25 cm2 培养瓶

25

5.0

5×106

75 cm2 培养瓶

75

15~30

2×107

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