QuantiGene Plex 人病毒宿主检测组合是一种侧重于人呼吸道病毒感染生物学相关 RNA 靶标的50通路检测组合,包括与免疫应答、病毒感染过程、细胞因子风暴、病毒 RNA(SARS-CoV-2、流感、呼吸道合胞病毒/RSV)等相关的靶标。该检测组合经过功能验证。如果不包含特定的感兴趣靶标,则可设计定制检测组合。每个全新和定制检测组合都会在您下单后三周内进行设计、制造、验证和发货。该检测组合与 QuantiGene Plex 测定试剂盒配合使用,后者含有在96或384孔板中进行测定所需的所有缓冲液、平板和检测试剂。
QuantiGene Plex 人病毒宿主检测组合的特点包括:
•真正的多通路检测 — 在同一孔中测量多达50个感兴趣基因和管家基因,无交叉反应性
• 能适应复杂的样品类型 — 支持 FFPE 组织和血液中降解和交联的 RNA
• 标准化平台 — 使用与 Luminex 200、MagPix 和 FlexMap3D 系统兼容的96或384孔板规格
• 简单工作流程 — 采用类似 ELISA 的工作流程,此工作流程将转录本直接与微珠杂交并进行转录本标记
• 大量经验证靶标库存 — 如需将其他靶标添加至此检测组合,可从超过22,000个基因中选择,以创建通路和以疾病为主题的检测组合
• 定制检测组合的周转时间短 — 在没有您的基因的情况下,我们可在三周内创建定制检测组合
QuantiGene Plex 测定试剂盒是基于杂交的测定试剂盒,用于直接定量细胞裂解物、组织匀浆中的 RNA 或纯化 RNA,并且能够通过多通路检测在同一孔中测量多个靶标。QuantiGene Plex 测定试剂盒包含两个组成部分:靶标特异性探针组和捕获磁珠。它们使用靶标特异性探针捕获感兴趣 RNA,然后采用分支 DNA 技术放大荧光信号,再用 Luminex xMAP 仪器读取荧光信号。
靶标: SARS-CoV-2 泛探针(orf1ab、膜糖蛋白、核衣壳)、ORF3a、ORF7a、ORF8、RdRP/NSP12、S 蛋白、TMPRSS2、ACE2、AT2、NF-κB、DPP4 (CD26)、包膜蛋白、流感泛探针、RSV 泛探针、CD4、CD8a、HLA-DR、CD38、CD25、CD14、CD19、RORc、TBX21、GATA3、NCAM1 (CD56)、CD11d、IFITM1、CCL2 (MCP-1)、CCL3 (MIP-1a)、IFNg、Il12A、IL6、IL8a、IL1b、IFNa、Il10、IL2、TNFa、IL4、颗粒酶 B、IL18、IP10 (CXCL10)、GM-CSF、IL17A (CTLA8)、VEGF-A、GAPDH、GUSB、HPRT1、PPIB、RPL13A
技术
QuantiGene Plex 测定试剂盒利用分支 DNA (bDNA) 技术。首先,将细胞(或血液)裂解或将组织样品(包括 FFPE)均质化以释放靶标 RNA。其次,将寡核苷酸探针组与靶标 RNA 和 Luminex xMAP 微珠组一起孵育过夜。在该孵育过程中,探针与靶标协同杂交,捕获与每个微珠结合的探针,捕获靶 RNA。第三,通过将 bDNA 预扩增剂、扩增剂和标记探针分子依次与靶标杂交进行信号放大。加入亲和素藻红蛋白会产生与样品中存在的靶标 mRNA 数量成正比的发光信号。这样,可以(相对)定量基因表达,使用该特定检测组合能够研究病毒感染过程、人(宿主)免疫特征和细胞因子风暴生物标记物,以及是否存在 SARS-CoV-2 和精选流感和 RSV 株。
应用
QuantiGene Plex 测定试剂盒研究应用包括药物发明的化合物筛选、生物标记物验证、siRNA 抑制效率、临床试验样品的前瞻性和/或回顾性分析、微阵列验证、预测毒理学以及易位和融合基因检测。