2',7'-二氯荧光素二乙酸酯 天津本生

　　中文名称:2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

　　英文名称:2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate

　　别名: DCFH-DA

　　CAS No:4091-99-0 分子式:C24H16Cl2O7 分子量:487.29

　　MDL:MFCD00128955

　　规格:25mg/50mg/100mg/1g

　　外观与性状：白色粉末

　　溶解性：溶于DMSO (25 mg/ml)

　　保存条件：-20℃ 避光 干燥

　　包装：25mg 50mg 100mg 500mg 1g in glass bottle

　　产品描述：

　　2',7'-二氯荧光素二乙酸酯 天津本生 产品简介:

　　一种细胞可渗透的非荧光探针。在细胞内脱酯化的并可经氧化转化为具有强荧光的2′,7′-二氯荧光素。

　　应用包括响应氧化代谢的活性氧的灵敏快速定量;用于吞噬细胞中的氧化产物的微孔板检测;以及定量多孔髓样分化测定。

　　细胞染色方案(仅供参考):

　　1.制备1-10mM DMSO储备溶液。 应将未使用的DMSO储备溶液等分到单次使用的小瓶中并储存在-20℃，避光。

　　2.在生理缓冲液(如PBS，HBSS，HEPES)中使染料的工作浓度为1-10μM。根据经验确定最佳工作浓度。

　　3.从生长培养基中取出细胞，将染料工作溶液(来自步骤2)加入细胞中，并在室温或37℃下孵育细胞5至60分钟。

　　4.去除染料工作溶液; 用预热的HBSS洗涤，加入预热的HBSS或生长培养基，在最佳温度下孵育。 最佳孵育时间可能相差较大，因为一些细胞类型通常表现出低水平的酯酶活性。

　　5.在将细胞暴露于实验诱导物之前，确定加载细胞样品的基线荧光强度。

　　6.阴性对照应评估如下：

　　A:检查未染色的细胞在绿色发射范围内的自发荧光。

　　B:对于流式细胞术，确定染料加载和处理后细胞的正向和侧向散射不变。细胞尺寸的变化可能与处理或毒性反应引起的起泡或收缩有关。

　　C:检测有没有诱导物的染料和缓冲液/培养基的无细胞混合物的荧光。在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，荧光随时间的逐渐增加可能与自发水解，大气氧化或光诱导有关。

　　D:检查已经保存在生长培养基或简单缓冲液中的未处理(对照)负载细胞的荧光。在染料加载孵育后，健康细胞应表现出低水平的荧光，在实验期间相对稳定; 然而，可以观察到荧光逐渐增加(由于自动氧化)或减少(由于细胞中的染料损失或光漂白)。 在没有任何刺激或诱导的情况下，健康的未经处理的细胞中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。

　　7.可以用H2O2或叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激阳性对照至终浓度~100μM(基于细胞的敏感性和反应增加或减少剂量)。

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