本生知识点—ELISA样本分析及实验原理

　　elisa试剂盒实验原理：

　　试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中产品水平。用纯化的其抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入本产品，再与HRP标记的其抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中产品的浓度。

　　elisa试剂盒种属：人，大鼠，小鼠，鸡，鸭，鱼，猫，马，猪，兔，仓鼠，豚鼠，裸鼠，植物等elisa试剂盒。

　　ELISA样本分析：

　　1.回温平衡：

　　在加样之前约半小时左右，把试剂盒从冰箱中取出，放置在室温下进行平衡，平衡到用手握住试剂瓶感觉到不凉为止。如果时间匆忙的话也可以利用手握住试剂瓶进行快速回温。

　　2.反应时间：

　　尽量把时间控制在需要的反应时间，如果时间比较紧迫的话也可以把时间稍微延长几分钟，但不宜太长。显色时间可根据颜色深浅进行调整。

　　3.加样：

　　取出相应数量的微孔板放置在板架上，然后再对板孔进行编号，再对需要稀释的抗体或酶标记物进行稀释。在板孔的前六个孔内分别加入标准品1-6，然后在剩下的板孔内加入样品分析液。然后再在每孔内加入其余需要加入的液体。盖上盖板膜以后小幅度振荡，然后放置在相应的环境中进行反应。如是25℃环境反应，则可放置在空调房内进行反应;如果是37℃环境下反应，则必须放置在37℃恒温培养箱里进行反应，如果是4℃环境下反应，则必须放置在2-8度冰箱里进行培养。

　　4.洗板：

　　把板内液体甩干，加入稀释好的洗液250ul/孔，静置10s或稍作振荡后甩掉孔内液体，再次加入洗液，以此重复3-4遍，洗完以后利用吸水纸把孔内液体充分拍干后进行下一步操作，如果孔内有气泡，则利用干净的枪头刺破。

　　5 结束实验:

　　把加样枪全部调到zui大量程,试剂盒放入冰箱,试管及离心管进行清洗,关闭不用的仪器.

　　ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。