基底胶的应用及使用方法

　　基底胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质，其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、肝素糖蛋白，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下，基底胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。

　　基底胶的使用方法：

　　1、培养细胞时可无需稀释直接包被，包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。Matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面，根据细胞类型和应用目的确定相应Matrigel浓度。

　　2、Matrigel在10℃以上即可成胶，在操作过程中，保持Matrigel一直置于冰上，所有接触Matrigel的细胞培养器皿，移液吸头，分装管等都必须预冷后使用。

　　3、Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色)，是由于酚红和碳酸氢盐与CO2 作用引起的，与5%CO2 平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel 分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。

　　4、解时可将Matrigel 基质置于4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后的Matrigel可以在4℃ 24-48h后重新呈液态。

　　基底胶的应用：

　　基底胶可形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，基底胶还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。不同配方的基底胶可以满足不同的实验要求。

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