ELISA中常见的假阴性的因素

在ELISA实验中，假阴性的常见原因主要包括内源性因素、外源性因素、操作因素和试剂盒自身因素。为了减少假阴性的发生，需要从多个方面进行预防和解决。

内源性因素

基因突变：个别个体的基因突变可能导致检测结果为假阴性，尤其是当检测用抗体的结合位点在突变区时。

待检物含量偏低：样本内被测物的浓度较低，易造成假阴性结果，如某些疾病发展初期被检物浓度低于检测限。

外源性因素

样品反复冻融：血清样品的反复冻融会使血清中的抗体效价下降，造成假阴性出现。

样品处理不当：标本用肝素或EDTA等抗凝剂处理，高浓度肝素具有强大的负电荷，能吸附酶标记物不易洗脱，导致假阴性结果。

样品存放不当：标本放置时间过长，抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。

操作因素

加样不准确：样品稀释液多加或血清少加，会降低血清中待检IgG的吸附性，导致假阴性结果。

洗涤不当：洗涤条件一致性较差或洗涤机使用不当，血清中残留的纤维蛋白丝或洗涤液析出的结晶易造成“花板”，导致假阳性或假阴性。

孵育问题：温箱调温器异常使温箱温度降低或孵育时反复打开温箱门，造成孵育时反应不充分，出现假阳性结果。

试剂盒自身因素

试剂盒敏感性：某些厂家为了提高检测的特异性，会降低试剂盒的敏感性，从而造成在检测过程中假阴性的出现。

为了减少ELISA实验中的假阴性，需要从标本采集、处理、保存到实验操作和试剂盒选择等多个环节进行严格控制和管理。这包括优化标本处理流程、提高操作一致性、选择高质量的试剂盒等措施。通过这些措施，可以有效降低ELISA实验中假阴性的发生率，提高实验结果的准确性和可靠性。x

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