BUNSEN本生:如何防止细胞培养瓶被污染?
时间:2023-11-09 阅读:2103
如何防止细胞培养瓶被污染?
细胞培养瓶一般盖子都是封闭的,不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多:密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的,聚酯盖常用于开放培养,只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。细胞培养实验所需的物品、器材应进行严格的灭菌或购买无菌的一次性物品。玻璃瓶可拧松瓶盖灭菌(指高压蒸汽灭菌,以下同)或用铝箔纸包住瓶口,和瓶盖分别灭菌。其它玻璃和金属器材用铝箔纸包裹进行灭菌。
细胞培养瓶由硼硅酸盐玻璃制成,用于细胞的高效培养。产品尺寸紧密、透光性好、表面光滑、无瑕疵,而其宽口径的瓶口设计方便了细胞的存取和瓶壁的清洗。那么,你们知道细胞培养瓶污染如何防止吗?
1,从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
2,操作的时候护服、kouzhao、手套缺一不可。操作前,准备好所有实验所需物品,以减少走动,物品需有序摆放在超净台触手可及的地方,同时空留足够操作空间。
3,操作时,试剂不用尽量及时盖上盖子,移至操作区外围,尽量不要从开口容器上经过。
4,使用移液枪时,将容器倾斜以便于移液,切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况,要及时用酒精棉球擦拭,以免液体残留导致细菌滋生。
5,先取试剂、耗材,再取移液枪、安装头。很多人习惯先安装头,然后去拿试剂、耗材,殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。
6,向废液缸打废液时,需轻柔,以免造成水花四溅,污染枪头、枪体。实验结束,及时倒掉废液缸垃圾,冲洗之后喷洒酒精,放入超净台紫外照射杀菌。
7,冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时,从液氮罐取出冻存管,轻拧盖子,以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处,在37度水浴锅中快速解冻,水面不可超过冻存管盖沿;不建议直接扔进水中,以免水渗入造成污染。
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