本生移液器知识点:移液枪的使用方法有哪些?
时间:2022-12-13 阅读:3389
本生移液器知识点:移液枪的使用方法有哪些?
对于移液器的使用方法主要哪些,本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,ELISA试剂盒,动物血清,全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、八联管、96孔板、384孔板。下面本生小编将详细阐述下:
量程的调节:
在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以量取的度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
设定容量 :设定所需要的容量时应调整到大于设定容量值的 1/4 圈,再调至设定值,这样可排除机械间隙,使设定量值准确,即先将容量调节钮旋转超过目的容量值的 1/4 圈,再向下调至设定值。
枪头(吸液嘴)的装配:
在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的道对准个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法:
移液之前,要移液器、枪头和液体处于相同温度(如果是从并冰箱里拿出来的话呢?)。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。
一 是前进移液法。用大拇指将按钮按下至停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。松开按钮。
二 是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。
维护保养时的注意事项:
如不使用,要把移液枪的量程调至值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。
高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。
校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。
使用时要检查是否有漏液现象。方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下几方面:
1、枪头是否匹配;
2、弹簧活塞是否正常;
3、如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体,然后再移液。
可调式自动取液器的操作方法:
用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字,在取液器下端插上一个塑料吸头,并旋紧以气密,然后四指并拢握住取液器上部, 用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,向下按到停点,将取液器的吸头插入待取的溶液中,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体,排液时吸头接触倾斜的器壁,先将按钮按到停点,停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间),再按压到第二停点,吹出吸头尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸头,可按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。
移液器使用注意事项:
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g.
(7)在设置量程时,请注意?旋转到所需量程?数字清清楚楚在显示窗中,?所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作
3. 吸头浸入角度和深度:
吸头浸入角度控制在倾斜20度之内,保持竖直为佳;吸头浸入深度建议如下所示:
移液器规格 吸头浸入深度
2uL和10 uL 1 mm
20uL和100uL 2-3 mm
200uL和1000 uL 3-6 mm
5000uL和10 mL 6-10 mm
对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品,吸头润洗反而降低操作准确性,请使用者特别注意。
微量移液器的使用方法:
一、标准操作
适用的液体:水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液。
1)按到档,垂直进入液面几毫米。
2)缓慢松开控制按钮,否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸人移液器内部吸入体积减少。
3)打出液体时贴壁并有一定角度,先按到档,稍微停顿1s后,待剩余液体聚集后,再按到第二档将剩余液体全部压出。
二、黏稠或易挥发液体的移取
在移取黏稠或易挥发的液体时,很容易导致体积误差较大。为了提高移液准确性,建议采取以下方法:
1)移液前先用液体预湿吸头内部,即反复吸打液体几次使吸头预湿,吸液或排出液体时多停留几秒。尤其对于移取体积大的液体(如1000~1),建议将吸头预湿后再移取。
2)采用反相移液法:吸液时按到第二档,慢慢松开控制按钮,打液时按到第二档,部分液体残留在吸头内。
三、常见的错误操作
1)吸液时,移液器本身倾斜,导致移液不准确(应该垂直吸液,慢吸慢放)。
2)装配吸头时,用力过猛,导致吸头难以脱卸(无需用力过猛,选择与移液器匹配的吸头)。
3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。
4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。
5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。
6)使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器(应该参照正确清洗方法操作)。
可调式移液器的标准操作程序(SOP)/加样枪操作规程
【目的】
规范仪器设备的操作程序,加样器的正常状态。
【适用范围】
本实验室加样器的操作。
【操作人员】
本实验室实验人员。
【操作步骤】
1.设定容量值:转动加样器的调节旋钮,反时针方向转动旋钮,可提高设定移液量。顺时针方向转动旋钮,可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。
2.预洗:当装上一个新吸头时应预洗吸头,先吸入一次液体并将之排回原容器中。
3.吸液:
[1] 选择合适的吸头安放在移液套筒上,稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙。
[2] 取液之前,所取液体应在室温(15℃-25℃)平衡。
[3] 把按钮压至停点,垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3 毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮,吸入液体,等一秒钟,然后将吸头提离液面,贴壁停留2-3秒,使管尖外侧的液滴滑落。好象不要再吸,不然会再吸进空气的。
4.放液:
[1] 将吸头口贴到容器内壁底部并保持100~40°倾斜。
[2] 平稳地把按钮压到停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体。
[3] 压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。
[4] 松开按钮。
[5] 按吸头弹射器除去吸头。
5.加样器吸嘴为一次性使用。
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