SPG膜技术：艾信条码与艾信纳米粒相结合，实现高灵敏度多路复用检

基于光学编码微球的悬浮阵列技术在基因分析、蛋白谱分析、早期疾病诊断、治疗监测等方面的多路检测受到了广泛的关注。但条码的荧光稳定性和检测灵敏度有待进一步提高，以满足日益增长的“精准诊断”需求。

方法:本工作报道了一种基于极稳定的AIEgens(AIE33和AIE NIR800)微球作为条形码，AIEgens1,1,2,3,4,5-六苯基- 1h -silole, HPS)微球作为荧光信号报告器，并结合流式细胞仪进行多路检测的新型悬浮阵列平台。

结果:由于HPS纳米粒具有良好的荧光信号放大效应，与QDs纳米粒(提高3倍)和商业有机染料藻红蛋白(提高5倍)作为荧光信号报告物的多重检测方法相比，我们的多重检测方法具有更高的检测灵敏度。

结论:此外，验证实验显示，在患者血清样本中检测过敏原的临床金标准方法与ImmunoCAP相似，该悬浮阵列平台具有良好的荧光稳定性和较强的信号放大能力，具有高灵敏度多路生物检测的应用前景。

介绍：

利用光学编码微球的悬浮阵列在高通量多路检测中发挥了突出的作用，由于其快速结合动力学、高通量多路检测和高检测灵敏度，是基因分析、蛋白谱分析、早期疾病诊断和治疗监测的强大工具。荧光编码微球通常被用作固体载体和跟踪码，以实现对多个目标的并行检测，是悬浮阵列中使用的主要技术之一。荧光编码微球的理想性能是编码容量大、均匀性好、荧光稳定性高。高检测灵敏度对于低浓度蛋白或其他生物分子对疾病的早期准确诊断也非常重要。虽然目前的悬架阵列技术比传统的检测平台具有更高的检测灵敏度，但灵敏度还需要进一步提高，以满足“精准诊断”日益增长的需求。

结论

综上所述，我们将AIEgens引入到悬浮阵列中，并成功构建了一种基于AIEgens微珠作为条形码、AIEgens纳米粒作为荧光信号报告器、单激光激发流式细胞仪进行多路检测的新型悬浮阵列平台。我们利用简易的Shirasu多孔玻璃(SPG)膜乳化方法，通过简单地改变SPG膜的孔径，合成了AIEgens条形码和AIEgens纳米粒。制备的微球粒径分布窄，荧光均匀性好，荧光稳定性好。它们的荧光强度也非常稳定，即使在高酸性和高碱性的溶液中，证明了在报道的光学编码珠中具有的荧光稳定性。我们通过改变AIEgens (HPS, AIE41, AIE33和AIE NIR800)的发射波长和发光强度水平，成功地制作了一个包含30个基于“单波长”编码方法的二维AIEgens条形码库。此外，我们将AIE33和AIE NIR800微珠条形码和HPS微珠荧光信号报告仪结合在流式细胞仪上检测单一样本中5种常见的过敏原。使用AIEgens纳米粒作为荧光信号报告器的多重检测方法与使用商业化的藻红蛋白有机标签(提高5倍)和QDs纳米粒(提高3倍)作为报告器的多重检测方法相比，具有更高的检测灵敏度。表明HPS纳米粒具有良好的荧光信号放大效应。通过检测95例患者样本获得的结果表明，与目前的临床免疫cap金标准方法相比，每种过敏原在灵敏度和特异性方面都实现了类似的检测特性。结果表明，基于具有优异荧光稳定性的AIEgens微球和具有较强信号放大能力的AIEgens纳米球的悬浮阵列平台具有良好的生物应用前景，未来可应用于其他蛋白质、核酸和细胞因子。