如何选择合适您细胞分选的MACS分选柱
时间：2021-07-05 阅读：6521
美天旎分选柱（Column）是MACS技术的核心，其特点如下：填充有不同规格的铁珠，可分选或者去除10^7-10^10细胞；表面亲水包被，不损伤细胞，同时保证流速；可以将磁场放大1000-10000倍，因此只需少量的细胞表位被识别即可被磁场捕获，从而为后续实验预留足够抗原表位，如磁珠分选后的细胞无需切除磁珠即可直接染流式抗体，而不受影响。
美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？
我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱：
美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？
我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱：
阳性分选
1、根据要分选的细胞数量选择分选柱：
1、根据要分选的细胞数量选择分选柱：
MS柱容纳的细胞上样量是2×10^8细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞是10^7。
LS分选柱细胞上样量是2×10^9细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞是10^8。
2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞
为了在分选稀有细胞（表达率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。在阳性分选中，过两次分选柱可以获得更高纯度的细胞。
3、大体积的细胞
另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell columns。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。
LS分选柱细胞上样量是2×10^9细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞是10^8。
2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞
为了在分选稀有细胞（表达率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。在阳性分选中，过两次分选柱可以获得更高纯度的细胞。
3、大体积的细胞
另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell columns。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。
去除分选
去除分选中需要考虑以下几个因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？
2 抗原表达强还是弱呢？
3 您需要更高的纯度还是回收率呢？
4 您需要分选多少细胞？
根据这几个因素，您可以选择合适的去除分选柱。
去除分选中需要考虑以下几个因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？
2 抗原表达强还是弱呢？
3 您需要更高的纯度还是回收率呢？
4 您需要分选多少细胞？
根据这几个因素，您可以选择合适的去除分选柱。
注意：某些MACS Cell Isolation Kits先进性去除分选（第一步分选），然后进行阳性分选（第二步分选）。请使用说明书中推荐的分选柱。
三、分选柱对应搭配的分选器（磁力架）的推荐
1、MS分选柱和Large Cell Columns，适配的分选器为单通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
三、分选柱对应搭配的分选器（磁力架）的推荐
1、MS分选柱和Large Cell Columns，适配的分选器为单通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
2、LS和LD分选柱或 Whole Blood Columns，适配的分选器为单通道的midiMACS或者4通道的QuadroMACS。
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