电动移液器制备384孔板，快稳准
时间：2023-11-16 阅读：756
在高通量应用中，384孔板的制备越来越普遍，与此同时，减少样品制备差异和用户错误的需求也在增加。
赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器可简化样品制备流程，提高速度和准确度。其具有的多种功能不仅可减少移液错误，还允许用户更快生成数据。
384孔板实验应选择哪种移液器？
选择移液器时，必须考虑每个移液器的工作量程。移液器在其标称(最大)容量下可提供较精确性能。因此，虽然使用单个移液器覆盖大容量范围非常方便，但选择多个移液器将确保获得可靠的结果。表1列出了基于应用和所需容量推荐的移液器。
表1
如何将样品从96WP转到384WP ？
制备384WP检测时，通常是从96孔板(96WP)格式的样品或标准来转移。多通道移液器可轻松将96WP转到384WP。与手动移液相比，使用电动移液器有助于加快孔板的样品转移进程(表2)。另一个好处是，电动移液器的孔板向导功能有助于用户在每次吸液和排液步骤中始终了然加样的孔位。
表2
如何在384WP 移液中使用孔板向导功能？
处理少量样品时，保持正确的孔与移液间的顺序是一项挑战。电动移液器可以使用孔板向导功能防止此类错误。例如，将Picus® 移液器的孔板向导功能设置为按列或按行移液，并报告下一行接收液体的孔。
多通道移液器上的孔板向导功能可显著提高用户对384WP 制备的信心和速度。
如何在384WP中进行细胞接种和补液？
为了在384WP的每个孔中获得准确细胞数，须以适当方式制备细胞悬液或稀释液。这只需通过根据良好移液操作对电动移液器进行编程即可(表3)。
表3
不良移液操作(快速排液、产生气泡)以及在细胞接种后立即将孔板放入培养箱，会导致细胞在孔中分布不均匀(图1A)。与良好移液操作相比，这可能会导致细胞数量在细胞接种后24小时内减少70%。良好移液操作可实现均匀细胞分布和良好细胞活力(图1B)。
图1. B16F10 小鼠黑色素瘤细胞以(A)不良和(B)良好移液操作在384 孔板中接种。
可通过调节电动移液器的吸液和排液速度，以温和方式进行细胞培养补液(培养基更换)，尽量降低分离粘附细胞的风险。移液速度过快或正向移液会产生气泡并对实验产生负面影响(图2A)。该问题可通过反向移液或使用多次分液模式轻松避免，该模式无需最后一次吹空即可输送目标体积(图2B)。
图2. 在384 孔板中接种细胞或向其分配细胞培养基时，移液模式很重要。
A)如果通过正向移液添加培养基，则会形成气泡。细胞培养基DMEM + 10% FBS.
B)将培养基移至384 孔板的孔中，反向移液或多次分液不会形成气泡。
多次分液模式显著加快了384WP中细胞接种或培养基更换的速度(表4)。
表4
赛多利斯 iQue® Screener 的实验制备应使用哪种Picus® Nxt 移液器？
iQue® 试剂盒说明书包含了每个工作流程步骤的详细描述，这些方案使用了Picus® 移液器开发。图3和表5列出了我们为在384WP 中制备iQue® 人T细胞活化及细胞因子分析(TCA)试剂盒的每个步骤推荐的移液器和设置。
图3
表5
总结
电动移液器在涉及384WP的细胞培养应用中具有许多优势。电动移液器的移液模式和速度等移液操作标准化有助于改善细胞健康，减少用户间的差异，使实验结果更具可重复性。孔板向导功能尤其有助于避免用户在长时间连续移液的工作流程中出错。重要的是，电动移液器具有符合人体工程学的优点，有助于防止用户疲劳，从而进一步增强对数据准确度的信心。