Streptavidin-CY5,Cy5标记-链霉亲和素

• 链霉亲和素(SA)简述：

  链霉亲和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似，等电点6.0，非特异性结合远比亲和素低。

  链霉亲和素(SA)的来源：

  SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物，主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯，1L培养液中含蛋白10~60mg。链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈。

  链霉亲和素(SA)的应用：

  enzyme immunoassays, 酶免疫测定

  immunohistochemistry, 免疫组织化学

  flow cytometry, 流式细胞仪

  Western blot, 原位杂交

  immunoblotting procedures免疫印迹程序

  Western blot免疫印迹

  链霉亲和素(SA)的荧光标记物及激发波长：

  荧光染料	颜色	Ex（nm）	Em（nm）
  FITC	绿色	490	525
  TRITC	黄色	547	572
  Cy3	黄色	555	570
  Cy5	红色	646	620
  Cy7	深红色	750	773

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荧光标记的链霉亲和素(SA)的介绍：

FITC-Streptavidin：

FITC是广泛使用的荧光基团，但其的缺点是淬灭快，使用抗淬灭剂可以减轻。

花青染料（Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin）：

Cy2比FITC更稳定，且在表面荧光显微镜下，Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮，更稳定，背景更弱。二者常在共聚焦显微实验中作多标记。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察，因此通常用具有远红外检测器的共聚焦显微镜观察。

TRITC-Streptavidin:

TRITC,RRX,TR:TRITC经常和FITC一起用于双标记实验中，也可以使用RRX或TR，但TR会产生较高的背景。在使用装有氪氢灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记实验时，RRX尤其有用，可以和Cy2（或FITC）及Cy5一起使用，因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间，且和这两者的重叠很少。