牛血清过滤工艺简介
时间：2024-12-03 阅读：164
生物技术中细胞培养是核心工艺，高水平的细胞培养依赖于高质量的培养基。在培养基的主要成份中，动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要作用。血清不仅富含多种蛋白、生长因子等细胞生长必须的营养成分，同时可提供贴壁因子、蛋白酶抑制剂等保护细胞不受伤害。
在动物血清中牛血清的应用最为广泛，所以保证牛血清的质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。一般体外细胞培养的牛血清多采用胎牛血清、新生牛血清、小牛血清。
不同牛血清的来源：胎牛血清源自健康母牛体内的胎牛，是通过胎牛心脏穿刺采血获取的血清；新生牛血清从出生2周内的新生牛静脉取血获取。小牛血清采自出生2周到1年内的小牛静脉取血；
牛血清成品的获取
• 胎牛、新生牛、小牛的血液采集及储存
• 原血全程冷链运输
• 原血冷冻离心，收集血清、冻存
• 血清使用前解冻、过滤
• 成品质量检测
血清使用前解冻
① 将血清从冷冻室移至2~8℃冰箱解冻，再放置室温进行彻底解冻，这样可以避免温度变化太大，造成蛋白析出；
② 解冻时需不断均匀摇晃，这样操作可以使血清的温度和成分均一，以减少絮状沉淀物的生成；
③ 严禁将血清在37℃长时间孵育解冻，否则血清可能会产生沉淀&许多较不稳定的成分也会受到破坏而影响血清品质。
血清使用前过滤工艺
步骤1：粗血清大多数前处理会使用线绕滤芯或膜堆过滤去除粘性物质；根据客户工艺的不同，也会使用到滤袋、玻纤进行过滤。
PP折叠滤芯
PES/PVDF膜滤芯
步骤2：一步0.45-1μm或2-3μm+0.45-1μm两步预过滤，其作用是去除杂质的同时保护后端膜过滤，比较常用的膜材质是亲水性PES或PVDF；
步骤3：0.22μm和0.1μm的除菌、除支原体过滤，确保成品无细菌、无支原体。
过滤工艺其他注意点有哪些？
1. 血清过滤开始时，滤速可以控制相对小一些，后逐步升至正常滤速，这样可以延长滤芯的使用寿命；
2. 一般血清过滤前和过滤完成后，需对0.22μm/0.1μm过滤产品进行完整性检测。