人髓鞘碱性蛋白抗体分析_髓鞘碱性蛋白抗体ELISA试剂
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2017-04-25 14:55:24
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产品简介

QY-RM0915人髓鞘碱性蛋白抗体ELISA试剂盒human MBP Antibody ELISA Kit
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详细介绍

QY-RM0915    人髓鞘碱性蛋白抗体ELISA试剂盒    human MBP Antibody ELISA Kit 

人髓鞘碱性蛋白抗体分析_髓鞘碱性蛋白抗体ELISA试剂组织匀浆液的制备

①、手工匀浆:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放

入匀浆管中,按重量(g):体积(ml)=1:4 的比例加入 4 倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水

浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块,将玻璃匀浆管置于冰水浴条件,手动匀浆,30 秒/

次,间隔 30秒,重复 6~8 次,制成20%的匀浆液。

②、机器匀浆:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放

入匀浆管中,按重量(g):体积(ml)=1:4 的比例加入 4 倍体积的匀浆介质于匀浆管中,冰水

浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块,机械式匀浆机(组织捣碎机或内切式匀浆机) ,

10000~15000 转/分,冰水浴条件下,15 秒/次,间隙 30 秒,连续 3~5 次,制成 20%的匀浆液。

③、液氮研磨:取组织块(0.2g~0.5g)在冰冷的匀浆介质中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放

入研钵中,用眼科小剪尽快剪碎组织块,加入液氮研磨粉末状(研磨要迅速),加入匀浆

介质,充分抽提,制备成 20%的匀浆液。

镜检观察:取少量组织匀浆作涂片,显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。

匀浆上清液的制备:将制备好的 20%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机 3500 转/分左右,离

心 10~15 分钟,取上清液进行测定.

人髓鞘碱性蛋白抗体分析_髓鞘碱性蛋白抗体ELISA试剂样本保存:

植物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如*冻融,-20℃以下

可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。

制备好的匀浆液建议不要冻存,当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部

分指标 4℃可存放 3~5 天(如 SOD 要存放 2~3 天,MDA 可存放 3~5,总蛋白测定可存 5~7 天等)

如指标太多可将匀浆上清液分装保存,每次测定时每个样本取出一管用于测定,切勿反复冻

融。

[注]:磷酸盐缓冲液作为匀浆介质,不可用于无机磷、ATP酶、ATP 含量、羟自由基等相关检测项目;

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