呋喃西林快速检测试剂盒_美国REAGEN进口试剂盒货号 99023    呋喃西林检测试剂盒    Nitrofurazone   (SEM) ELISA Test Kit    96T    美国REAGEN™呋喃西林酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中呋喃西林（SEM）残留的定量检测
齐一生物销售：REAGEN^™呋喃西林酶联免疫反应测试盒

RND99023

• 概述

REAGEN^™呋喃西林酶联免疫反应测试盒是利用竞争性的酶联反应原理，用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中呋喃西林（SEM）残留的定量检测。检测肉样时该试剂盒的前处理方法可作为与AOZ、CAP、SEM、AHD五合一前处理方法统一处理一个样品，同时检测几个项目。该试剂盒有以下特点：

• 高回收率(75%-105%)，多种样品的低成本提取方法。
• 高灵敏度（0.05ppb）；多样品低检测下限（虾/鱼/肉类0.1ppb）。
• 高重复性。
• 检测过程只需要不到1.5小时。
• 五合一处理方法更省时、经济、环保。

2．试剂盒原理

REAGEN^™呋喃西林酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理，含有呋喃西林(SEM)的抗体已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果样品中含有SEM，会竞争SEM抗体，抑制SEM-HRP与板上包被的抗体结合。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中SEM的浓度成反比。

呋喃西林快速检测试剂盒_美国REAGEN进口试剂盒3. 试剂盒组成

已包被的酶标板（可拆式）                                         12×8 孔

标准液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                            6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可选                                        1×0.8ml

HRP酶标抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×样品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×浓缩洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

终止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，

请将SEM-HRP酶标抗原放置-20℃或者冰冻保存。

4.检测限

5.交叉反应

6．未提供的设备或材料

• 酶标仪(450 nm)
• 恒温培养箱
• 匀浆器
• 蒸干器
• 漩涡振荡器
• 移液枪(50，100mL，1mL各一支)
• 多道移液器（50-300mL）
• 乙酸乙酯
• 0.1M K₂HPO₄
• 正己烷

7.注意事项

实验前请阅读以下文字，以保证获得实验效果。

• 标准品中含有呋喃西林，请小心使用。
• 不要使用过期的试剂盒。
• 不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
• 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
• 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。
• 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。
• 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的*性，先添加标准品后添加样品。
• 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。
• 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。

8．样品的准备

确保样品的正确保存，一般来说，样品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更长时间，就要保存在-20冷冻保存，在用之前需要将冷冻的样品在室温下或冰箱内解冻。

1×样品提取液

按1：9的比例配制样品提取浓缩液和双蒸馏水。

1）饲料（用于检测添加到饲料中的鱼粉、虾粉或动物组织的SEM）

• 取0.5g匀质样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋振荡1min；
• 50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，zui大转速涡旋震荡1min；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始样品）到另一试管（避免触及下层水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70 °C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品提取液，zui大转速涡旋振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：4.0

2）鱼/虾/肉（牛肉/鸡肉/猪肉）：可用于五合一前处理方法

• 称取1g匀浆样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，涡旋震荡30秒；
• 50°C恒温培养3h，培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；
• 室温下（20-25℃）4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品)到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），如果出现乳化现象，上清液不足3mL，请85℃水浴3分钟。在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；（注：肝脏组织富含脂肪、色素等，为防止乳化现象，建议选用4mL正己烷溶解，涡旋震荡30秒后，再进行下一步操作）
• 加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡1分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

稀释倍数：2.0

3）鸡蛋

• 称取1g鸡蛋样品加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL蒸馏水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡30秒；
• 50°C恒温培养3小时，在培养期间，每1h振荡5秒；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，涡旋震荡振荡30s；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60-70℃减压蒸馏或60-70℃氮气吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品抽提工作液体，剧烈振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

注意：为了避免过高的背景值，建议用空白样品做平行，从取3ml乙酸乙酯上清旋转蒸发开始。

4）蜂蜜

• 称取1g蜂蜜加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；
• 50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大转速振荡1min；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

5）牛奶

• 对于含脂牛奶，取待测牛奶样品3ml室温4000g，5min。除去上层脂肪层。（对于脱脂奶粉，次步略）
• 取1ml样品，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；
• 50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，zui大转速振荡1min；室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

6）血清

• 称取1g血清加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；
• 50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大转速振荡1min；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；

• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品提取液，剧烈
• 振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；

• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

     稀释倍数：2.0

7）尿样

• 取3ml尿样，4000g离心5min。
• 离心后称取1ml，加入0.5mL1×样品提取液，3.5mL双蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，剧烈振荡1分钟；
• 50°C恒温培养3小时；（说明书后的**标记方法可供选择）
• 加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，zui大转速振荡1min；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 取3mL上清液(包含了0.5g的原始样品) 到另一试管（避免触及下层水相！如果移取液中含有水相，再次4000g离心5分钟，取上层有机相），在60 -70°C减压蒸馏或60-70°C氮气吹干；
• 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的样品；
• 加入1mL1×样品提取液，剧烈振荡2分钟；
• 室温下4000g离心10分钟；
• 每孔取100 µL下清液，进行样品测试。

稀释倍数：2.0

10．检测步骤

试剂的准备

注意：试剂在使用之前要在室温下解冻1-2小时，确定在使用前阅读过注意事项。准备适量的检测用试剂，所有的试剂摇匀后使用。准备足够所有小管所需的用量，不能将试剂倒回原来的瓶子中，处理试剂时建议用废弃的瓶子以降低污染的风险。齐一生物科技欢迎您订购咨询.手机.在线咨询:1091367877                                  其它产品货号 99030    巴氏消毒验证检测试剂盒    Pasteurization Verification Test Kit    96T    美国REAGEN
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